[發明專利]可用于納米孔系統的位點特異性生物綴合方法和組合物

有效

• 申請號: 201780019277.0
• 申請日: 2017-03-23
• 公開（公告）號: CN109069662B
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發明（設計）人: D.格雷米亞欽斯基;C.齊齊洛尼斯
• 申請（專利權）人: 吉尼亞科技公司
• 主分類號: A61K47/66
• 分類號: A61K47/66;C07K1/107;G01N33/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權陸軍;黃希貴

1.包含結構式(IVa)的修飾的孔形成蛋白的組合物

其中，

S是所述孔形成蛋白的硫醇基團的硫原子；

A是硫醇反應性基團；

L_A是接頭；且

X是點擊化學反應性基團；

Y是點擊化學反應性基團，其經歷與反應性基團X的點擊化學反應；

L_B是接頭；且

B是反應性基團，

其中式(IVa)的修飾的孔形成蛋白包含選自式(IVb)、(IVc)、(IVd)、(IVe)、(IVf)和(IVg)的化合物的化合物：

，

且其中反應性基團B包含SpyTag肽。

2.包含式(V)的蛋白和生物分子的綴合物的組合物

其中，

S是所述蛋白的硫醇基團的硫原子；

A是硫醇反應性基團；

L_A是接頭；且

X是點擊化學反應性基團；

Y是點擊化學反應性基團，其經歷與反應性基團X的點擊化學反應；

L_B是接頭；

B是反應性基團；

且

Z是能夠與反應性基團B形成共價鍵的反應性基團，

其中所述點擊化學反應性基團X和Y是選自以下對點擊化學反應性基團的對：疊氮化物和炔烴；疊氮化物和環辛炔；以及疊氮化物和二苯并環辛炔-胺，

其中所述硫醇反應性基團A是馬來酰亞胺，

其中式(V)的綴合物包含選自式(Vb)、(Vc)、(Vd)、(Ve)、(Vf)和(Vg)的化合物的化合物：

，

其中反應性基團B包含SpyTag肽，且反應性基團Z包含SpyCatcher蛋白，

其中所述蛋白是嵌入膜中的孔形成蛋白，且

其中所述生物分子是能夠催化聚合物合成的酶，其任選地選自DNA聚合酶、RNA聚合酶、逆轉錄酶和DNA連接酶。

3.權利要求2的組合物，其中所述SpyTag肽和SpyCatcher蛋白各自包含來自釀膿鏈球菌纖連蛋白結合蛋白FbaB的CnaB2結構域的氨基酸序列的片段。

4.權利要求2-3中任一項的組合物，其中所述蛋白是孔形成蛋白，其任選地選自α-溶血素、β-溶血素、γ-溶血素、氣單胞菌溶素、溶細胞素、殺白細胞素、蜂毒肽、MspA孔蛋白和孔蛋白A。