[發明專利]數字微生物學

在審

• 申請號: 201780018627.1
• 申請日: 2017-01-25
• 公開（公告）號: CN109526227A
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發明（設計）人: C·奎林;C·弗維埃;P·薩法蒂;J·F·莫斯卡德特;R·雷伯弗斯基;R·戴法特
• 申請（專利權）人: 生物輻射歐洲有限公司;生物輻射實驗室股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C08K5/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 張靜;錢文宇

1.一種用于確定樣品中是否存在微生物的方法，所述方法包括：

i)將樣品包封在多個油包水乳液液滴中，其中所述油包水乳液液滴還包封微生物生長培養基；

ii)在允許微生物生長的溫度下培養所述多個油包水乳液液滴，并保持足以使靶微生物經歷5至45的倍增時間的時段；

iii)鑒定包含靶微生物的油包水乳液液滴；和

iv)響應于鑒定至少一個油包水乳液液滴中的靶微生物，確定樣品中存在靶微生物。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述靶微生物選自：細菌、酵母和霉菌，并且其中所述培養步驟進行的時段對應于：

當靶微生物是細菌時，至少約4小時且不超過約16小時；

當靶微生物是酵母時，至少約6小時且不超過約12小時；和

當靶微生物是霉菌時，至少約8小時且不超過約36小時。

3.如權利要求2所述的方法，其中所述靶微生物選自：細菌、酵母和霉菌，并且其中所述培養步驟進行的時段對應于：

當靶微生物是細菌時，至少約4小時且不超過約8小時；

當靶微生物是酵母時，至少約8小時且不超過約12小時；和

當靶微生物是霉菌時，至少約8小時且不超過約24小時。

4.一種用于確定樣品中是否存在微生物的方法，所述方法包括：

i)將樣品包封在多個油包水乳液液滴中，其中所述油包水乳液液滴還包封微生物生長培養基；

ii)在不培養油包水乳化液滴的情況下，鑒定包含靶微生物的油包水乳液液滴；和

iii)響應于鑒定至少一種油包水乳液液滴中的靶微生物，確定樣品中存在靶微生物。

5.如前述權利要求所述的方法，其中：

所述油包水液滴還包含嵌入染料；

所述油包水液滴不包含溶解劑；和

鑒定包含靶微生物的油包水液滴包括檢測所述嵌入染料。

6.如權利要求1-4中任一項所述的方法，其中：

所述油包水液滴還包含標記的蛋白；

所述油包水液滴不包含溶解劑；和

鑒定包含靶微生物的油包水液滴包括檢測所述標記的蛋白。

7.如權利要求6所述的方法，其中，所述標記的蛋白選自：標記的抗體，標記的凝集素和標記的纖維蛋白原。

8.如權利要求6或7所述的方法，其中，所述油包水液滴還包含牛血清白蛋白。

9.如任意前述權利要求所述的方法，其中，所述樣品是環境樣品。

10.如權利要求5或6所述的方法，其中，所述樣品包括來自娛樂水體的水。

11.如權利要求5或6所述的方法，其中，所述樣品取自表面。

12.如權利要求5或6所述的方法，其中，所述樣品是臨床樣品。

13.一種用于快速測定食物基質中每單位質量或體積的多種靶微生物的方法，所述方法包括：

i)使食物基質的一部分均質化，其中所述基質的一部分具有已知的質量或體積；

ii)將均質化的基質包封在多個油包水乳液液滴中，其中所述油包水乳液液滴還包封微生物生長培養基；

iii)在允許微生物生長的溫度下培養所述多個油包水乳液液滴，并保持足以使靶微生物倍增5至45倍的時段；

iv)從培養的油包水乳液液滴中確定：

多個含有微生物的油包水乳液液滴，從而確定多個陽性液滴；和

多個不含微生物的油包水乳液液滴，從而確定多個陰性液滴；和

v)從陽性液滴和陰性液滴的數量確定靶微生物的總數，從而確定每單位質量或體積的食物基質的靶微生物的數量。