[發明專利]核酸樣品的制備方法

有效

• 申請號: 201780012761.0
• 申請日: 2017-06-07
• 公開（公告）號: CN108699589B
• 公開（公告）日: 2021-08-13
• 發明（設計）人: 井上高良;八谷輝
• 申請（專利權）人: 花王株式會社
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806;C12N15/09
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 龍淳;尹明花

本發明提供了一種以微創方式從被檢測體采集核酸樣品的方法。本發明提供制備來自被檢測體的皮膚細胞的核酸的方法，包括從被檢測體采集的皮膚表層脂質中分離核酸的步驟。

技術領域

本發明涉及核酸樣品的制備方法。

背景技術

近些年，伴隨著分析技術的迅猛發展，已經能夠對各種各樣生物體樣品中的分子(核酸、蛋白質、代謝物等)進行詳細分析。而且，利用這些分子分析對人體內現在、甚至將來的生理狀態進行調查的技術也在發展當中。其中，對于使用核酸分子進行的分析，已經建立了全面的分析方法，具有如下優點：通過一次分析就能獲得豐富信息，而且基于許多單核苷酸多態性或RNA功能的研究報告能夠很容易對分析結果建立功能性的聯系。

全世界的許多研究機構都在開發使用以微創方式或非侵入的方式采集的生物體樣品中的核酸分子進行如疾病等的診斷和預測的技術，該技術在應用化方面取得了飛速的進展。其中，常用的是使用DNA或RNA的診斷技術。使用DNA的診斷技術是通常采集唾液或口腔內的細胞，對其中包含的基因組DNA的單核苷酸多態性進行分析，由此對將來的疾病風險或自身的體質進行診斷的方法。另一方面，使用RNA的診斷技術是根據血液、尿等生物體樣品中含有的RNA表達情況，對現在生物體內疾病的有無進行診斷的方法(非專利文獻1)。

生物體的各種各樣的組織中，因為皮膚是與外界接觸的組織，所以皮膚作為一種能夠以微創性的方式采集的生物體樣品組織引起了人們的注意。現有技術中，作為從皮膚以非侵入的方式或微創方式采集核酸的方法，報道有使用膠帶剝離角質層或拔出的毛發的方法(非專利文獻2、專利文獻1)。然而，通過剝離角質層采集核酸的缺點是：必須要使用專用的膠帶；采集量為微量；以及，從采集的核酸只能獲得來自表皮的表達信息等。此外，從拔出的毛發采集核酸的缺點是：拔毛時伴有疼痛；以及，從采集的核酸只能獲得來自毛囊的表達信息等。此外，作為以非侵入的方式從皮膚采集核酸的方法，還有如下方法：使用濕潤的藥棉拭子(棉球)在皮膚表面擦拭以采集人皮膚樣本，然后進行RNA特征分析(非專利文獻3)。對于該報道中采集的人皮膚樣本而言，從其采集方法來看，不存在皮膚表面上的脂質。

(專利文獻1)特開第2005-192409號

(非專利文獻1)《臨床檢驗科學評論》(Crit Rev Clin Lab Sci),2014,51,200-231

(非專利文獻2)《皮膚病學研究期刊》(J Invest Dermatol),2006,126,2234-2241

(非專利文獻3)《國際法醫學:遺傳學》(Forensic Sci Int Genet)，2012,6(5):565-577

發明內容

一方面，本發明提供一種制備來自被檢測體的皮膚細胞的核酸的方法，其中，包括從被檢測體采集的皮膚表層脂質中分離核酸的步驟。

另一方面，本發明提供一種核酸的分析方法，其中，包括對通過上述方法制備的核酸進行分析的步驟。

另一方面，本發明提供一種制備來自被檢測體的皮膚細胞的核酸的試劑盒，其中，包括被檢測體的皮膚表層脂質的采集工具。

附圖說明

[圖1]各種生物體樣品中包含的RNA。

[圖2]來自各種生物體樣品的RNA中mRNA的表達。

[圖3]SSL中表皮、汗腺、毛囊、真皮和皮脂腺的標志物基因的表達量。

[圖4]下一代測序儀和實時PCR的表達量結果的相關性分析。

具體實施方式

本領域中希望開發一種不用考慮采集者或場所，并且能夠以微創性的方式從被檢測體采集核酸樣品的方法。而且希望從得到的核酸樣品能夠獲得來皮膚和其他各種各樣的組織或器官的信息。