[發(fā)明專利]細(xì)胞培養(yǎng)容器、細(xì)胞培養(yǎng)容器的支撐夾具、以及細(xì)胞培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201780011599.0
• 申請(qǐng)日: 2017-03-27
• 公開（公告）號(hào): CN108699500B
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田中鄉(xiāng)史;末永亮;戶谷貴彥
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東洋制罐集團(tuán)控股株式會(huì)社
• 主分類號(hào): C12M1/00
• 分類號(hào): C12M1/00;C12M1/04;C12N5/02;C12N5/071
• 代理公司: 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 任巖

本發(fā)明提供一種細(xì)胞培養(yǎng)容器(1)，其具備由具有透氣性的塑料膜形成的容器主體(2)和注入注出用口(3)，容器主體(2)的周邊部被密封，其頂面(2a)側(cè)具有鼓出形狀，并且在底面(2b)設(shè)有多個(gè)成為細(xì)胞培養(yǎng)部的凹部(4)，向細(xì)胞培養(yǎng)容器(1)中，從注入注出口(3)將培養(yǎng)對(duì)象的細(xì)胞與培養(yǎng)基一起注入容器主體(2)而進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。由此，可以在恰當(dāng)?shù)鼐S持培養(yǎng)時(shí)的細(xì)胞密度的同時(shí)，一面降低污染的風(fēng)險(xiǎn)，一面在同一容器內(nèi)高效地培養(yǎng)細(xì)胞。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及用于有效地培養(yǎng)各種細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)容器、細(xì)胞培養(yǎng)容器的支撐夾具、以及細(xì)胞培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

近年來，在醫(yī)藥品的生產(chǎn)、或基因治療、再生醫(yī)療、免疫療法等領(lǐng)域中，要求在人工環(huán)境下高效地大量培養(yǎng)、分化誘導(dǎo)細(xì)胞(包括組織、微生物、病毒等)。

在此種細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要將培養(yǎng)基中的細(xì)胞密度維持在合適的范圍。即，當(dāng)培養(yǎng)基中的細(xì)胞密度隨著細(xì)胞的增殖而變高時(shí)，會(huì)因增殖時(shí)所必需的培養(yǎng)基成分的枯竭、細(xì)胞自身的代謝產(chǎn)物的蓄積等而阻礙細(xì)胞的生長(zhǎng)，細(xì)胞的增殖效率降低。另外，如果培養(yǎng)基中的細(xì)胞密度過低，也無法使細(xì)胞高效地增殖、分化誘導(dǎo)。為此，在以某程度的規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞的情況下，通常以恰當(dāng)?shù)鼐S持培養(yǎng)基中的細(xì)胞密度的方式，在反復(fù)進(jìn)行繼代的同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。

以往，在繼代培養(yǎng)時(shí)，作為培養(yǎng)容器經(jīng)常使用孔板、燒瓶等。例如，已知可以使用孔板，以達(dá)到適度的細(xì)胞密度的方式，將細(xì)胞與培養(yǎng)基一起加入各個(gè)孔中而開始培養(yǎng)，在孔內(nèi)使細(xì)胞充分地增殖后轉(zhuǎn)移到燒瓶中，與細(xì)胞的增殖匹配地追加培養(yǎng)基而進(jìn)行培養(yǎng)，并且在增殖到一定量的時(shí)間點(diǎn)，轉(zhuǎn)移到更大容量的燒瓶中，再追加培養(yǎng)基，由此反復(fù)進(jìn)行繼代而大量地培養(yǎng)細(xì)胞(例如參照專利文獻(xiàn)1[0027]段等)。

需要說明的是，專利文獻(xiàn)2中，作為燒瓶型的培養(yǎng)容器，提出了在以長(zhǎng)方體等多面體形狀形成的容器的一面凹設(shè)有多個(gè)凹部的燒瓶型的培養(yǎng)容器。專利文獻(xiàn)2中，在凹設(shè)于第一培養(yǎng)面的多個(gè)成為第一培養(yǎng)部的凹部形成由單細(xì)胞的合并造成的凝集塊，將其轉(zhuǎn)移到形成于容器內(nèi)的第二培養(yǎng)面的與第一培養(yǎng)部相比面積更大的第二培養(yǎng)部，成為更大的凝集塊。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：日本特開2011-241159號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)2：日本特開2006-55069號(hào)公報(bào)

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明所要解決的問題

然而，在如此所述地進(jìn)行繼代培養(yǎng)時(shí)，在向孔板的各個(gè)孔中加入細(xì)胞時(shí)、或?qū)⒓?xì)胞從孔板向燒瓶轉(zhuǎn)移時(shí)，需要重復(fù)進(jìn)行幾次移液操作。另外，每次繼代時(shí)必須將細(xì)胞移到新的燒瓶等培養(yǎng)容器中，不僅有被強(qiáng)制進(jìn)行煩雜的操作的問題，而且還有細(xì)菌、病毒等的污染的風(fēng)險(xiǎn)也會(huì)變高的問題。

另外，在專利文獻(xiàn)2那樣的燒瓶型的培養(yǎng)容器中，只有在取下封閉開口部的蓋子而將開口部敞開時(shí)進(jìn)行氣體交換。因此，不僅有無法向培養(yǎng)中的細(xì)胞供給足夠量的氧的問題，而且還有在氣體交換時(shí)也無法避免污染的風(fēng)險(xiǎn)的問題。此外，在超過實(shí)驗(yàn)室水平以某程度的規(guī)模大量培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，容量受到限制的燒瓶型的培養(yǎng)容器不適合。

本發(fā)明是鑒于上述的情況而完成的，其目的在于，提供用于在恰當(dāng)?shù)鼐S持培養(yǎng)時(shí)的細(xì)胞密度的同時(shí)、一面降低污染的風(fēng)險(xiǎn)一面在同一容器內(nèi)高效地培養(yǎng)、分化誘導(dǎo)細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)容器、細(xì)胞培養(yǎng)容器的支撐夾具、以及細(xì)胞培養(yǎng)方法。

用于解決問題的方法

本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)容器采用了如下的構(gòu)成，即，具備由具有透氣性的塑料膜形成的容器主體、和注入注出用口，所述容器主體的周邊部被密封，容器頂面?zhèn)染哂泄某鲂螤睿⑶以谒鋈萜髦黧w的底面設(shè)有多個(gè)成為細(xì)胞培養(yǎng)部的凹部。

另外，本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)容器的支撐夾具采用了如下的構(gòu)成，即，是支撐上述的細(xì)胞培養(yǎng)容器的夾具，能夠在所述凹部非接觸地支撐所述容器主體的所述底面?zhèn)取?/p>