[發明專利]血管細胞外基質水凝膠

有效

• 申請號: 201780011327.0
• 申請日: 2017-01-13
• 公開（公告）號: CN108699522B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 斯蒂芬·F·巴迪拉克;小喬治·R·菲爾卡納;托馬斯·G·格利森;朱莉·安妮·菲利皮
• 申請（專利權）人: 高等教育聯邦系統-匹茲堡大學
• 主分類號: C12N5/077
• 分類號: C12N5/077;A61K35/12;A61L27/36;A61L27/50;A61L27/52;A61L27/22;A61P35/00
• 代理公司: 北京柏杉松知識產權代理事務所(普通合伙) 11413
• 代理人: 王春偉;劉繼富

1.一種制備細胞外基質(ECM)材料的方法，其包括：

a.在兩性離子洗滌劑中孵育血管外膜組織；

b.在胰蛋白酶-EDTA中孵育所述組織；

c.用陰離子洗滌劑孵育所述組織；

d.對所述組織進行消毒，從而產生脫細胞的ECM材料；

e.冷凍干燥所述脫細胞的ECM材料；

f.粉碎所述脫細胞的ECM材料；

g.用酸性蛋白酶部分或完全溶解所述脫細胞的ECM材料以產生溶解的ECM；

h.中和所述溶解的ECM以產生ECM預凝膠；和

i.任選地，在所述ECM預凝膠凝膠化以產生ECM凝膠的溫度下使所述ECM預凝膠凝膠化。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述血管外膜組織為牛、綿羊或豬的血管外膜組織。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述血管外膜組織為主動脈外膜。

4.根據權利要求1所述的方法，其中用過乙酸進行所述消毒。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述脫細胞的ECM材料未被所述酸性蛋白酶完全消化，從而產生能夠在37℃下凝膠化且包含未消化的脫細胞ECM顆粒的ECM預凝膠。

6.根據權利要求1所述的方法，其中所述ECM材料在沒有透析步驟或交聯步驟的情況下制備。

7.根據權利要求1所述的方法，其中：

a.所述兩性離子洗滌劑是CHAPS；

b.所述陰離子洗滌劑是SDS；

c.所述酸性蛋白酶是胃蛋白酶；和/或

d.在pH為1至4的溶液中用酸性蛋白酶溶解所述脫細胞的ECM材料。

8.根據權利要求7所述的方法，其中所述溶液的pH為1至2。

9.根據權利要求7所述的方法，其中所述溶液的pH為2.0±0.3。

10.根據權利要求1至9任一項所述的方法，其包括將所述ECM材料分散在天然的或合成的聚合物組合物中。

11.根據權利要求10所述的方法，其中所述天然的或合成的聚合物組合物是以下的一種或多于一種：第二ECM材料、纖維蛋白、膠原蛋白、聚酯(PE)、聚氨酯(PU)、聚酯型氨酯脲(PEUU)、聚醚酯氨酯脲(PEEUU)、聚酯碳酸酯氨酯脲(PECUU)、聚碳酸酯氨酯脲(PCUU)共聚物、聚烯烴、聚碳酸酯、聚酐、聚醚、聚脲、聚酮和含氟聚合物。

12.根據權利要求10所述的方法，其中所述ECM材料在所述ECM材料凝膠化之前或期間與所述天然的或合成的聚合物組合物混合。

13.根據權利要求10所述的方法，其中所述預凝膠與纖維蛋白以及纖維蛋白原混合并凝膠化，而所述纖維蛋白與所述纖維蛋白原交聯。

14.一種ECM組合物，其為pH為6.8至7.8、失活的酸性蛋白酶消化的主動脈外膜組織。