[發(fā)明專(zhuān)利]使用經(jīng)遺傳矯正的自體角質(zhì)形成細(xì)胞進(jìn)行的隱性營(yíng)養(yǎng)不良型大皰性表皮松解癥的基因療法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201780005233.2
• 申請(qǐng)日: 2017-01-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108473952B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-04-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 祖拉布·希普拉什維利;尼貢·T·紐倫;M·皮特·馬林科維奇;吉恩·唐;阿爾弗雷德·T·萊恩;保羅·A·卡瓦里
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 小利蘭·斯坦福大學(xué)托管委員會(huì);退伍軍人事務(wù)部代表的美國(guó)政府
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/071
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/071;C12N5/079;C07K14/78
• 代理公司: 北京弘權(quán)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11363
• 代理人: 郭放;許偉群

1.角質(zhì)形成細(xì)胞片層在制備用于治療受試者中的隱性營(yíng)養(yǎng)不良型大皰性表皮松解癥(RDEB)的藥物組合物中的應(yīng)用，其中所述角質(zhì)形成細(xì)胞片層包括皮膚細(xì)胞群，所述皮膚細(xì)胞利用包含編碼功能性人膠原蛋白VII(COL7A1)蛋白質(zhì)的基因構(gòu)建體的病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)，其中通過(guò)用包含所述基因構(gòu)建體的病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)來(lái)矯正所述皮膚細(xì)胞，并且其中所述轉(zhuǎn)導(dǎo)的皮膚細(xì)胞中的每一個(gè)具有不超過(guò)3的前病毒基因組拷貝數(shù)(PGCN)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述病毒包括逆轉(zhuǎn)錄病毒、AAV(腺伴隨病毒)或慢病毒。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其中所述逆轉(zhuǎn)錄病毒是LZRSE-病毒。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其中所述逆轉(zhuǎn)錄病毒被GalV-假型化。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中如此轉(zhuǎn)導(dǎo)的所述皮膚細(xì)胞符合病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率(VTE)50％的預(yù)釋放標(biāo)準(zhǔn)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中將所述角質(zhì)形成細(xì)胞片層移植到皮膚創(chuàng)面床，所述皮膚創(chuàng)面床任選地沒(méi)有未矯正的創(chuàng)面床角質(zhì)形成細(xì)胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其中處理所述皮膚創(chuàng)面床以消除未矯正的創(chuàng)面床角質(zhì)形成細(xì)胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述受試者患有隱性營(yíng)養(yǎng)不良型大皰性表皮松解癥(RDEB)。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述細(xì)胞對(duì)于所述受試者是自體的。

10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述受試者是人。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中將所述角質(zhì)形成細(xì)胞片層經(jīng)歷選自以下的一個(gè)或多個(gè)測(cè)試：VTE測(cè)試、PGCN測(cè)試、無(wú)菌測(cè)試、內(nèi)毒素測(cè)試、支原體測(cè)試、革蘭氏染色無(wú)菌測(cè)試、LEAES活力測(cè)試、釋放后測(cè)試、RCR測(cè)試、細(xì)胞毒性T細(xì)胞測(cè)定、抗C7 LH24 mAb表征、電子顯微鏡術(shù)、免疫電子顯微鏡術(shù)、免疫熒光染色、C7表達(dá)或AF分析。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其中所述免疫熒光染色包括直接或間接免疫熒光染色。

13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中將所述角質(zhì)形成細(xì)胞片層置于無(wú)細(xì)胞基質(zhì)、膠原蛋白基質(zhì)或生物相容性網(wǎng)片上。

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的應(yīng)用，其中所述生物相容性網(wǎng)片由熱塑性樹(shù)脂、聚乙烯、超高分子量聚乙烯、高分子量聚烯烴、未涂覆的單絲聚丙烯、聚醚醚酮、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚四氟乙烯、膨化聚四氟乙烯、尼龍、硅或其任何組合制成。

15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述皮膚細(xì)胞包括干細(xì)胞。

16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述前病毒基因組拷貝數(shù)(PGCN)小于2。

17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述前病毒基因組拷貝數(shù)(PGCN)小于1.5。

18.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述前病毒基因組拷貝數(shù)(PGCN)小于1。

19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述前病毒基因組拷貝數(shù)(PGCN)小于0.5。

20.一種角質(zhì)形成細(xì)胞片層，其包含皮膚細(xì)胞群，所述皮膚細(xì)胞利用包含編碼功能性人膠原蛋白VII(COL7A1)蛋白質(zhì)的基因構(gòu)建體的病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)，其中所述皮膚細(xì)胞中的每一個(gè)具有不超過(guò)3的前病毒基因組拷貝數(shù)(PGCN)。