[實用新型]一種蛋白質純化裝置

有效

• 申請號: 201721861786.1
• 申請日: 2017-12-27
• 公開（公告）號: CN207958195U
• 公開（公告）日: 2018-10-12
• 發明（設計）人: 葛峰;熊倩;楊明坤;張珈;洪斌;李俊峰;付帥;張書晨
• 申請（專利權）人: 南昌普威生物科技有限公司
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224
• 代理人: 董建林

本實用新型公開一種蛋白質純化裝置，包括依次連接的層析柱、pH調節裝置，所述pH調節裝置依次連接透析柱、提純裝置、收集罐，所述提純裝置包括純化槽，在所述純化槽的兩側分別設置與外界絕緣的金屬正、負極板，所述金屬正、負極板通過導線、開關與控制系統中的高壓電源相接以產生電場。本實用新型所述一種蛋白質純化裝置對目標蛋白質粗提純后進行精提純，所提純的目標蛋白質純度高。

技術領域

本實用新型屬于提純設備，具體涉及一種蛋白質純化裝置。

背景技術

蛋白質在生物、化學、藥劑研究應用中使用廣泛，蛋白質的分離純化對蛋白質的應用具有重要影響，由于蛋白質存在于復雜的生物體系中，且自身不穩定，遇熱或遇某些溶劑容易變性失活，故傳統的蒸餾、溶劑萃取等分離技術并不適用于蛋白質的分離純化。目前，蛋白質的分離純化方法只要包括以下幾種：

1、超速離心法

此法利用各種顆粒在梯度液中沉降速度不同，使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度梯度層內，達到分離和純化蛋白質的目的，因此超速離心或梯度密度離心分離純化法只適用于少數大分子蛋白質的分離，如IgM、C1q，甲狀腺球蛋白等，多數的中、小分子量蛋白質采用此種方法很難純化。

2、選擇性沉淀法

該方法根據各蛋白質理化特性的差異，采用各種沉淀劑或改變某些條件促使蛋白質抗原成分沉淀，從而達到純化的目的，最常用的方法是鹽析沉淀法。鹽析法的原理為蛋白質在水溶液中的溶解度取決于蛋白質分子表面離子周圍的水分子數目，亦即主要是由蛋白質分子外周親水基團與水形成水化膜的程度以及蛋白質分子帶有電荷的情況決定的。蛋白質溶液中加入中性鹽后，由于中性鹽與水分子的親和力大于蛋白質，致使蛋白質分子周圍的水化層減弱乃至消失。同時，中性鹽加入蛋白質溶液后由于離子強度發生改變，蛋白質表面的電荷大量被中和，更加導致蛋白質溶解度降低，使蛋白質分子之間聚集而沉淀。由于各種蛋白質在不同鹽濃度中的溶解度不同，不同飽和度的鹽溶液沉淀的蛋白質不同，從而使之從其他蛋白分離出來。最常用的鹽溶液是33％～50％飽和度的硫酸銨。鹽析法簡單方便，可用于蛋白質抗原的粗提，丙種球蛋白的提取，蛋白質的濃縮等。鹽析法提純的抗原純度不高，只適用抗原的初步純化。

3、凝膠層析法

凝膠層析是利用分子篩作用對蛋白質進行分離。凝膠是具有三維空間多孔網狀結構的物質，經過適當的溶液平衡后，裝入層析柱。一種含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經層析柱時，大分子物質不易進入凝膠顆粒的微孔，只能分布于顆粒之間，因此在洗脫時向下移動的速度較快，最先被洗脫。小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外，還可以進入凝膠顆粒的微孔中，洗脫時向下移動的速度較慢，隨后被洗脫。因此，蛋白質分子按分子大小被分離，故采用該方法只適用于蛋白質的粗步純化。

4、親和層析

親和層析是利用生物大分子的生物特異性，即生物大分子間所具有專一親和力而設計的層析技術。例如抗原和抗體、酶和酶抑制劑(或配體)、酶蛋白和輔酶、激素和受體、IgG和葡萄球菌蛋白A(SPA)等物質間具有一種特殊的親和力。例如提純IgG時，可將SPA吸附在一個惰性的固相基質上，并制備成層析柱。當樣品流經層析柱時，待分離的IgG可與SPA發生特異性結合，其余成分不能與之結合。將層析柱充分洗脫后，改變洗脫液的離子強度或pH值，IgG與固相基質上的SPA解離，收集洗脫液便可得到欲純化的IgG。親和層析法純化蛋白質抗原的主要優點是純度高，簡單快捷，但成本較貴。

發明內容

本實用新型的目的是針對現有技術存在的問題，提供一種蛋白質純化裝置，所述蛋白質純化裝置能夠高效純化多種蛋白質。

為實現上述目的，本實用新型采用的技術方案是：