[實用新型]過濾吸附式核酸快速提取裝置

有效

• 申請號: 201721649121.4
• 申請日: 2017-12-01
• 公開（公告）號: CN207699577U
• 公開（公告）日: 2018-08-07
• 發明（設計）人: 錢志平;惠李;杜向東
• 申請（專利權）人: 錢志平
• 主分類號: C12M1/12
• 分類號: C12M1/12;C12M1/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

本實用新型公開了過濾吸附式核酸快速提取裝置，包括注射器、過濾器、過濾膜、吸附柱上方部件、吸附膜、濾板、吸附柱下方部件和吸頭，其中，吸附柱上方部件包括上部管體和下部管體，下部管體外層帶有螺紋；過濾器分成圓形的上下兩部分，上部分與注射器頭部相連，下部分與吸附柱上方部件相連接，上下部分之間放置過濾膜并用超聲波熔接密封。本實用新型旨在提供一種過濾吸附式核酸快速提取裝置，可以直接快速地提取樣本中的核酸，其提取過程無需使用離心機等儀器設備，節約了大量時間，簡化了許多操作步驟，適用于現場和一些特殊場合應用，同時取消了塑料壓環，能夠有效避免殘留液體對擴增環境的影響，提高了實驗的準確性。

技術領域

本實用新型涉及分子生物學技術領域，具體涉及過濾吸附式核酸快速提取裝置。

背景技術

從各種生物樣本中提取核酸，在分子生物學技術領域中已經成為最基本和最常用的技術。目前提取核酸的方法主要有以下幾種：

1.有機提取法

基本原理：苯酚使蛋白變性，SDS裂解細胞膜，蛋白酶K和EDTA消化蛋白或多肽或小肽，核蛋白變性降解使DNA從核蛋白中游離出來。利用DNA易溶于水，不溶于有機溶劑的特性提取DNA。

2.螯合樹脂法

基本原理：以主要使用的螯合樹脂chelex-100為例，其含有成對的亞氨基二乙酸鹽離子，對高價金屬離子有很高的親和力和螯合作用。在低離子強度、堿性及煮沸下可以使細胞膜裂解，并使蛋白變性，DNA游離。

3.無機提取法

基本原理：利用NaCI或醋酸鈉沉淀蛋白，經離心，用無水乙醇沉淀提取DNA。

4.差異裂解提取法

基本原理：利用某些生物樣本的細胞膜易于破碎，另一些生物樣本的細胞不容易破碎的特點，使用常規方法先去除易于破碎細胞，再用特殊試劑裂解不容易破碎細胞，再提取其中的DNA。

5.磷酸鹽緩沖液法

基本原理：細胞在含非離子去垢劑和蛋白酶K的溶液中消化后，高溫加熱使蛋白質及蛋白酶K失活，離心沉淀分離蛋白質，從離心上清液中提取DNA。

6.甲酰胺解聚法

基本原理：甲酰胺可裂解DNA與蛋白質的復合物，又可變性沉淀釋放的蛋白質，但對蛋白酶K的活性無顯著影響。用高難度甲酰胺裂解染色質中DNA與蛋白質，然后用火棉膠袋進行充分透析去除蛋白酶K及有機溶劑。此法適合于構建高容量載體的基因組DNA文庫及進行大片段的脈沖場凝膠電泳分析。

7.玻璃棒纏繞法

基本原理：DNA會沉淀于細胞裂解液和乙醇的交界面，用帶鉤的玻璃棒將大片段DNA從無水乙醇中轉移至PH8.0的TE液中。此法適用于構建基因文庫，PCR擴增，適合于同時從不同細胞或組織標本中提取DNA。

8.基于二氧化硅吸附提取核酸的方法

基本原理：利用二氧化硅吸附核酸的特性,生物體經異硫氰酸胍，roton X-100的Tris-HCl-EDTA處理后核酸與二氧化硅結合，再經含有異硫氰酸胍的Tris-HCl緩沖液和70%乙醇以及丙酮分別洗滌，最后用TE洗脫，獲取核酸。

9.玻璃纖維膜吸附法

基本原理：玻璃纖維膜具有與核酸可逆性結合的特點，生物體裂解液中的DNA在促吸附液的作用下與玻璃纖維膜結合，用去蛋白液去除玻璃纖維膜上吸附的蛋白及其他雜質，再用洗滌液再次清洗玻璃纖維膜上吸附的蛋白及其他雜質，最后用洗脫液將玻璃纖維膜上吸附的核酸洗脫下來。

10.磁珠法