[發明專利]雌激素受體和使用方法

有效

• 申請號: 201110351822.0
• 申請日: 2005-03-10
• 公開（公告）號: CN102504025A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 王兆一
• 申請（專利權）人: 克賴頓大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C07K14/705;C07K17/00;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N15/12;C12Q1/68;A61K39/395;A61P35/00;G01N33/68;G01N33/53
• 代理公司: 北京萬慧達知識產權代理有限公司 11111
• 代理人: 楊穎;張一軍

本申請是申請號為200580007467.8(PCT/US2005/007857)，申請日為2005年3月10日的中國發明專利申請“雌激素受體和使用方法”的分案申請。

繼續申請數據

本申請要求享有2004年3月10日提交的美國臨時申請系列號60/552,067和2005年1月13日提交的60/643,469的利益，其每篇都在這里引作參考。

政府資助

本文所述的發明是在健康和人類服務部(Department?of?Health?and?Human?Services)資助號CA84328的支持下完成的。美國政府享有本發明的某些權利。

發明背景

雌激素是在卵巢、睪丸和可能的腎上腺皮質中形成的類固醇化合物的總稱。雌激素和具有雌激素活性的化合物的實例包括二乙基己烯雌酚、己烯雌酚二磷酸酯、己雌酚、聚磷酸雌二醇、溴苯雌酚、氯烯雌醚、己二烯雌酚、二乙基己烯雌酚、丙甲雌酚、雙醋羥雌酮、6，9-去氫馬烯雌酮、馬烯雌酮、雌二醇、雌三醇、雌酮、乙炔雌二醇、美雌醇、mexestrol、雌三醇環戊醚和炔雌醚。雌激素調節生殖組織和乳房、心血管、骨、肝和腦組織中的多種生理過程。雌激素也用在口服避孕藥中。雌激素的其它用途包括，緩解絕經的不適，抑制泌乳，和治療骨質疏松癥、先兆流產和各種功能性卵巢病癥?？勾萍に厮幈挥糜谥委熮D移性乳腺癌和晚期前列腺癌。

雌激素的作用由雌激素受體介導。在1986年克隆了首個雌激素受體(ER)(Green等，Nature，320：134(1986)和Greene等，Science，231：1150(1986))。在1995年之前，認為僅有一個負責天然的和合成的雌激素和抗雌激素藥的所有生理和藥理作用的雌激素受體。然而，在1995年，克隆了第二個雌激素受體(Kuiper等，PNAS，93：5925(1996))。發現的首個雌激素受體現在稱作雌激素受體-α(ER-α)，而第二個雌激素受體稱作雌激素受體-β(ER-β)。

ER-α和ER-β共有共同的結構體系(Zhang等，FEBS?Letters，546：17(2003)和Kong等，Biochem.Soc.Trans.，31：56(2003))。二者都由3個獨立的但是能相互作用的功能結構域組成：N-末端A/B結構域、C或DNA-結合結構域和D/E/F或配體-結合結構域(圖1)。ER-α的N-末端結構域編碼獨立于配體的激活功能(AF-1)，即參加與輔激活物的相互作用和靶基因的轉錄活化的區域。DNA-結合結構域或C結構域含有2個鋅指結構，其在受體二聚化和與特定的DNA序列的結合中起重要作用。C-末端D/E/F結構域是一種配體-結合結構域，其能介導配體結合、受體二聚化、核轉位和配體-依賴性的反式激活功能(AF-2)。AF-1和AF-2對轉錄控制的相對貢獻以細胞特異性的和DNA??啟動子特異性的方式變化(Berry等，EMBO?J.，9：2811(1990)和Tzukerman等，Mol.Endocrin.，8：21(1994))。

已經表明，缺少ER-α基因的全長基因產物的前173個氨基酸的46-kDa?ER-α同種型(A/B或AF-1結構域)，源自跳過外顯子1的ER-α基因的可變剪接(Flouriot等，EMBO?J.，19：4688(2000))。該可變剪接事件會產生mRNA，其在有利于翻譯起始的Kozak序列內具有與原始可讀框的剩余部分符合讀框的AUG。因此，ER-α的該新同種型稱作ER-α46，而原始同種型稱作ER-α66(Flouriot等，EMBOJ.，19：4688(2000))。ER-α46形成同二聚體，并結合雌激素反應元件(ERE)，且它也可以與ER-α66形成異二聚體(Flouriot等，EMBO?J.，19：4688(2000))。與ER-α66同二聚體相比，ER-α46同二聚體表現出更高的對ERE的親和力。而且，ER-α46/66異二聚體比ER-α66同二聚體優先形成，且ER-α46競爭地起作用，以抑制由結合了配體的-ER-α66的AF-1結構域介導的反式激活，但是不影響AF-2-依賴性的反式激活(Floutiot等，EMBO?J.，19：4688(2000))。因此，認為ER-α46是天然產生的ER-α同種型，其調節由ER-α66的AF-1結構域介導的雌激素信號傳導。