[實用新型]一種檢測細胞內ALDH活性的試劑盒

有效

• 申請號: 201720960709.5
• 申請日: 2017-08-03
• 公開（公告）號: CN207081659U
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發明（設計）人: 孟二紅;李剛毅;蓋麗云
• 申請（專利權）人: 北京多贏時代轉化醫學研究院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司11279
• 代理人: 田昕,司麗春

技術領域

本實用新型涉及檢測領域，特別涉及一種檢測細胞內ALDH活性的試劑盒。

背景技術

腫瘤中具有自我更新能力并能產生異質性腫瘤細胞的細胞被稱之為腫瘤干細胞，其被認為是造成惡性腫瘤復發的主要原因，因此腫瘤干細胞的研究是當今腫瘤領域的熱點。現有的腫瘤干細胞檢測手段復雜，效率低，通用性差，有的甚至對細胞有毒性。如：傳統的細胞表面標志分子如CD133,CD44，CD24等可用來分離鑒定某些腫瘤的腫瘤干細胞，但是這類標志分子常常需要將幾種標志分子組合在一起使用，并且這類標志分子不是腫瘤干細胞通用的標志分子；另外，Hoechst 33342也可以用來分離疑似腫瘤干細胞的側群細胞，但Hoechst 33342染色對細胞具有毒性，且某些腫瘤中的側群細胞并不能代表腫瘤干細胞本身。

干祖細、祖細胞和腫瘤干細胞均表達較高的乙醛脫氫酶(aldehydedehydrogenase，縮寫ALDH)活性，高ALDH活性被認為幾乎是所有腫瘤干細胞的通用標志，因此檢測細胞內ALDH活性的試劑盒對腫瘤干細胞的研究有重要意義。另外，檢測細胞內酶的反應速度很快，因此對所用檢測試劑的質量要求較高，而生化檢測試劑對環境變化敏感，如：運輸中的溫度變化和顛簸狀態都容易使生化檢測試劑失效，因此如何使該試劑盒中的各種試劑保持最佳性能也對腫瘤干細胞的研究有重要意義。

公開于該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本實用新型的總體背景的理解，而不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

實用新型內容

本實用新型提供了一種檢測細胞內ALDH活性的試劑盒，其內部結構使置于其中的特定試劑均能保持最佳性能且便于運輸。

本實用新型具體提供了以下技術方案：

一種檢測細胞內ALDH活性的試劑盒，包括試劑盒本體，所述試劑盒本體內設置有：

第一儲存區域，所述第一儲存區域內設置有干冰和第一試劑容器，并且所述干冰包圍在第一試劑容器外，所述第一試劑容器中儲存有未活化的乙醛脫氫酶底物氟硼二吡咯類熒光染料-氨基乙醛縮二乙醇(簡稱為BAAA-DA)；和

第二儲存區域，所述第二儲存區域內設置有冰袋、第二試劑容器和第三試劑容器，并且所述冰袋包圍在第二試劑容器和第三試劑容器外，所述第二試劑容器中儲存有乙醛脫氫酶特異性抑制劑二乙氨基苯甲醛(簡稱為DEAB)，所述第三試劑容器中裝有試驗緩沖液，所述試驗緩沖液是含有鹽酸維拉帕米和牛血清白蛋白的磷酸鹽緩沖液。

上述試劑盒在另一種實施方式中，所述第二儲存區域還設置有第四試劑容器，所述第四試劑容器被冰袋包圍，且第四試劑容器中儲存有HCl。

上述試劑盒在另一種實施方式中，所述干冰外設置有干冰袋。

上述試劑盒在另一種實施方式中，所述第一試劑容器、第二試劑容器和第四試劑容器中的一種或多種為棕色玻璃瓶。

上述試劑盒在另一種實施方式中，所述第三試劑容器為棕色塑料瓶。

上述試劑盒在另一種實施方式中，所述未活化的乙醛脫氫酶底物氟硼二吡咯類熒光染料-氨基乙醛縮二乙醇為濃度0.6-1.2g/L的氟硼二吡咯類熒光染料-氨基乙醛縮二乙醇溶液。

上述試劑盒在另一種實施方式中，所述乙醛脫氫酶特異性抑制劑二乙氨 基苯甲醛為濃度1.2-1.8mM的二乙氨基苯甲醛溶液。

上述試劑盒在另一種實施方式中，所述試驗緩沖液是含有濃度45-55μM鹽酸維拉帕米和濃度0.8-1.2％牛血清白蛋白的磷酸鹽緩沖液。

與現有技術相比，本實用新型具有如下有益效果：

1、本實用新型試劑盒設置了兩個儲存區域，第一儲存區域中的干冰可以吸收大量的熱量使環境溫度保持極低，適用于對溫度特別敏感的試劑，第二儲存區域中的冰袋也可以使置于其中的試劑保持低于室溫的溫度，本實用新型針對氟硼二吡咯類熒光染料-氨基乙醛縮二乙醇、二乙氨基苯甲醛、鹽酸維拉帕米和牛血清白蛋白的性質選擇了不同的儲存區域，使這些試劑都能保持最佳性能。

2、干冰和冰袋包圍在試劑容器周圍，可以相對固定試劑容器的位置，減輕試劑容器的顛簸狀態。

3、HCl是用來活化氟硼二吡咯類熒光染料-氨基乙醛縮二乙醇的，在本實用新型試劑盒中設置HCl可以方便使用者直接使用，無需額外配制。

附圖說明

圖1是本實用新型試劑盒的結構示意圖；

圖2是本實用新型試劑盒的工作原理示意圖；

圖3是本實用新型試劑盒使用時的實驗流程圖；