[發(fā)明專利]一種楊梅實生無性系的建立方法

有效

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• 申請日: 2020-10-23
• 公開（公告）號: CN112106663B
• 公開（公告）日: 2021-08-13
• 發(fā)明（設計）人: 王鵬凱;郄紅麗;黃穎宏
• 申請（專利權）人: 江蘇省太湖常綠果樹技術推廣中心
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

本發(fā)明公開了一種楊梅實生無性系的建立方法，屬于植物繁育技術領域。本發(fā)明包括：選取硬核期楊梅果實，去除果肉和果核殼，取出種子滅菌消毒；種子去除種皮保留種仁；將種仁接種于基本培養(yǎng)基上預培養(yǎng)；然后將在基本培養(yǎng)基上膨大變綠的種仁轉移至分化誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得分化的材料；再將分化的材料接種于不定芽誘導增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得分化的不定芽；最后將分化的不定芽逐個分開，接種于生根培養(yǎng)基培養(yǎng)生根，即得楊梅實生無性系。與現有技術中采用種子育苗相比，本申請采用未成熟種子的種仁作為外植體，大大縮短了育苗周期，一顆種仁能獲得多株實生苗，有利于加快楊梅新品種選育和品種更新的進程或獲得大量用于嫁接的優(yōu)良砧木。

技術領域

本發(fā)明屬于植物繁育技術領域，更具體地說，涉及一種楊梅實生無性系的建立方法。

背景技術

楊梅(Moreall rubra Bieb.et Zucc)是原產于我國特色果樹樹種，主要分布在長江以南地區(qū)。果實酸甜適口，風味獨特。近年來，楊梅種植面積發(fā)展迅速且效益顯著，已成為部分山區(qū)農民的重要收入來源。但楊梅推廣栽培中存在著品種類型單一的局面。長期來推廣的品種均為地方品種，或從優(yōu)選的單株中嫁接繁殖。

現有技術提供楊梅嫁接砧木和育種的方法主要都是通過培育種仁獲取實生苗的方式來進行，但成熟楊梅果殼較硬，出苗率較低(50-60％)，品質比較好的栽培品種出苗率則更低，而且育苗周期長，不利于加快楊梅新品種選育和品種更新的進程，因此，需要提供一種更加快速高效的方法獲得楊梅實生無性系。

植物組織培養(yǎng)和在此基礎上形成的植物快繁技術體系，是果樹開展高效育種與生產用品種繁育的重要平臺。其最大特點是可以在短時間內形成遺傳背景一致的無性系，為后續(xù)選擇測試提供大量材料，同時可以在室內保存，節(jié)約大量土地資源。有關楊梅組織培養(yǎng)的報道大多以莖段為培養(yǎng)材料，以種仁為培養(yǎng)材料至今未見報道。

發(fā)明內容

針對現有育種和繁育技術中存在的不足，本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種楊梅實生無性系的建立方法。

為了解決上述技術問題，本發(fā)明所采用的技術方案如下：

一種楊梅實生無性系的建立方法，包括如下步驟：

1)選取處于硬核期未成熟的楊梅果實，去除果肉和果核殼，取出種子，滅菌消毒備用；

2)將種子去除種皮，保留種仁；

3)將種仁接種于基本培養(yǎng)基上預培養(yǎng)；

4)將在基本培養(yǎng)基上膨大變綠的種仁轉移至分化誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得分化的材料，所述分化誘導培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+吲哚乙酸+TDZ+赤霉素；

5)將分化的材料接種于不定芽誘導增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得分化的不定芽，所述不定芽誘導增殖培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+吲哚丁酸+6-BA+赤霉素；

6)將分化的不定芽逐個分開，接種于生根培養(yǎng)基培養(yǎng)生根，即得楊梅實生無性系，所述生根培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+吲哚丁酸+赤霉素。

進一步地，所述楊梅實生無性系的建立方法，包括如下步驟：

1)選取處于硬核期未成熟的楊梅果實，去除果肉和果核殼，取出種子，滅菌消毒備用；

2)無菌條件下將種子去除種皮，保留種仁；

3)將種仁接種于基本培養(yǎng)基上預培養(yǎng)；

4)將在基本培養(yǎng)基上膨大變綠的種仁轉移至分化誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得分化的材料，所述分化誘導培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+0.5mg/L吲哚乙酸+0.5mg/L TDZ+0.5mg/L赤霉素；

5)將分化的材料接種于不定芽誘導增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得分化的不定芽，每30天繼代一次，所述不定芽誘導增殖培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+0.5mg/L吲哚丁酸+0.5mg/L 6-BA+0.3mg/L赤霉素；