[實(shí)用新型]快速定量檢測(cè)嘔吐毒素的熒光免疫層析試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201720357308.0
• 申請(qǐng)日: 2017-04-07
• 公開（公告）號(hào): CN206710440U
• 公開（公告）日: 2017-12-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖理文;徐秀;趙皖;劉偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京微測(cè)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/533
• 分類號(hào): G01N33/533;G01N33/558;G01N21/64
• 代理公司: 常州佰業(yè)騰飛專利代理事務(wù)所(普通合伙)32231
• 代理人: 高姍

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型屬于生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種快速定量檢測(cè)嘔吐毒素的熒光免疫層析試劑盒。

背景技術(shù)

嘔吐毒素主體成分為DON(deoxynivalenol,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇)，屬于單端孢霉烯族化合物，主要由禾谷鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、串珠鐮刀菌、擬枝孢鐮刀菌、粉紅鐮刀菌、雪腐鐮刀菌等鐮刀菌產(chǎn)生。另外，頭孢菌屬、漆班菌屬、木霉屬等的菌株都可產(chǎn)生該毒素。單端孢霉烯族毒素共有150多種，是一類強(qiáng)有力免疫抑制劑，所引起典型癥狀是采食量降低，所以這類毒素又叫飼料拒食毒素。嘔吐毒素(DON)是其中最重要一種毒素，主要來自鐮刀菌屬(Fusarium)，尤其是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)和黃色鐮刀菌(Fusarium culmorum)。由于它可以引起豬的嘔吐，故又名嘔吐毒素(vomitoxin，VT)。

嘔吐毒素是食品中常見的真菌毒素，在自然界中廣泛存在，通常在歐洲及北美發(fā)現(xiàn)的3種毒素是脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、3-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇和15-脫氧雪腐鐮刀菌烯醇。由于它們具有很高的細(xì)胞毒素及免疫抑制性質(zhì)，因此，對(duì)人類及動(dòng)物的健康構(gòu)成了威脅，特別是對(duì)免疫功能具有明顯的影響。根據(jù)DON的劑量和暴露時(shí)間不同可引起免疫抑制或免疫刺激。當(dāng)人攝入了被DON污染的食物后，會(huì)導(dǎo)致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀，嚴(yán)重時(shí)損害造血系統(tǒng)造成死亡。由于中國傳統(tǒng)飲食習(xí)慣中糧谷比例大大高于西方，使得嘔吐毒素的危害更為突出。1998年，在國際癌癥研究機(jī)構(gòu)公布的評(píng)價(jià)報(bào)告中，嘔吐毒素被列為3類致癌物。我國谷物、豬配合飼料、犢牛配合飼料、泌乳期動(dòng)物配合飼料中DON的限量標(biāo)準(zhǔn)為1.0mg/kg，牛配合飼料、家禽配合飼料中DON的限量標(biāo)準(zhǔn)為5.0mg/kg。

目前檢測(cè)嘔吐毒素的方法有多種，如薄層色譜法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、氣相色譜、高效液相色譜、紅外光譜分析等。高效液色譜相屬于國標(biāo)法，靈敏度高、準(zhǔn)確度高，但需要昂貴的儀器、樣品的前處理復(fù)雜、花費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，檢測(cè)成本高，不能現(xiàn)場(chǎng)操作，而且需專業(yè)人員操作，所以限制了其應(yīng)用。酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，對(duì)檢測(cè)環(huán)境要求高，需要專業(yè)人員操作，適合大量樣本的檢測(cè)，并且有相應(yīng)的數(shù)據(jù)處理。嘔吐毒素的熒光定量檢測(cè)試紙條配合相應(yīng)的熒光讀數(shù)儀，具有準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好，檢測(cè)成本低，環(huán)境要求低，操作簡(jiǎn)單，便與數(shù)據(jù)的管理，保存和上傳的特點(diǎn)。本產(chǎn)品適用于快速定量檢測(cè)糧食谷物(大米、玉米、小麥、大麥、高粱等)及其制品、飼料及其原料中嘔吐毒素的殘留濃度，樣品前處理簡(jiǎn)單，整個(gè)檢測(cè)過程僅需18min左右(前處理8min+檢測(cè)8min)，嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測(cè)試紙條的CUT OFF值為1000ppb，靈敏度100ppb，添加回收率80％～125％，線性范圍為100ppb～5000ppb，在10000ppb的濃度下與其他毒素?zé)o交叉反應(yīng)。適用于各類糧食谷物加工企業(yè)、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)及各級(jí)政府監(jiān)管部門。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型的目的是提供一種快速定量檢測(cè)嘔吐毒素的熒光免疫層析試劑盒，可快速、高效的檢測(cè)嘔吐毒素。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型所采用的技術(shù)方案是：包括盒體和蓋體，蓋體從盒體開口的一側(cè)密封盒體，蓋體上設(shè)有加樣孔和觀察窗，蓋體的內(nèi)壁滑動(dòng)的設(shè)有密封件，密封件滑動(dòng)過程中打開或封閉加樣孔，盒體內(nèi)設(shè)有免疫層析試紙條，所述免疫層析試紙條包括底板，底板上按照由一端至另一端的方向上順序搭接有樣品墊、結(jié)合墊、反應(yīng)墊和吸水墊，結(jié)合墊上吸附有熒光微球標(biāo)記嘔吐毒素抗體和熒光微球標(biāo)記雞IgY，反應(yīng)墊上設(shè)有檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)上包被有嘔吐毒素抗原蛋白，質(zhì)控區(qū)上包被有羊抗雞IgY。

優(yōu)選的，所述熒光微球?yàn)镋u³⁺標(biāo)記的乳膠微球。

優(yōu)選的，所述反應(yīng)墊為聚酯纖維素膜。

優(yōu)選的，所述蓋體的內(nèi)壁上設(shè)有滑槽，密封件的兩側(cè)嵌置于滑槽內(nèi)。

優(yōu)選的，所述密封件與一滑鈕連接，蓋體上設(shè)有長(zhǎng)條孔，長(zhǎng)條孔與滑槽平行，滑鈕穿過長(zhǎng)條孔并從蓋體的頂面伸出。

優(yōu)選的，所述盒體的底部設(shè)有定位件，所述免疫層析試紙條被定位件固定限位。

優(yōu)選的，所述定位件為一卡環(huán)。

優(yōu)選的，所述盒體和蓋體的一端鉸接，另一端通過扣接的方式使盒體與蓋體閉合。

采用上述技術(shù)方案后，本實(shí)用新型具有以下積極效果：