[實用新型]一種甲硝唑免疫膠體金快速檢測試劑卡

有效

• 申請號: 201720337792.0
• 申請日: 2017-03-28
• 公開（公告）號: CN206638680U
• 公開（公告）日: 2017-11-14
• 發明（設計）人: 呼秀智;陳笑笑;陳青舟;繆翁晟途;平夏婷
• 申請（專利權）人: 河北工程大學;杭州南開日新生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型屬于免疫膠體金快速檢測領域，具體涉及一種甲硝唑免疫膠體金快速檢測試劑卡。

背景技術

甲硝唑化學名為2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇，屬于硝基咪唑類抗菌藥，具有抗厭氧菌和抗原蟲的作用，主要用于治療雞、火雞組織滴蟲病、牛毛滴蟲病，還可與其它抗生素聯合，用于治療厭氧菌感染。此外，該類藥物還能促進牛、豬等動物的生長，常被用作飼料藥物添加劑。因而極易造成動物源性食品中甲硝唑的殘留。研究表明，甲硝唑對人體有多種毒副作用，包括消化系統、神經系統、心血管系統、皮膚癥狀、泌尿系統等的毒副作用。此外，甲硝唑還具有潛在的致癌作用。

為了食品安全，各國都出臺了相應政策，1998年，歐盟禁止甲硝唑用于動物食品；2002 年，美國FDA禁止在進口動物源性食品中使用甲硝唑及其它硝基咪唑類藥物；2003年，加拿大禁止所有5-硝基咪唑類化合物作為獸藥在食品中使用；2002年，我國農業部第236號公告規定，在食源性動物中禁用甲硝唑。盡管如此，動物源性食品中甲硝唑殘留事件時有發生，因此，檢測動物源性食品、飼料中甲硝唑的含量對保障食品質量安全具有重要意義。

當前，食品中甲硝唑殘留的檢測方法主要有高效液相色譜法、液相色譜-串聯質譜法、加壓毛細血管法、碳糊電極法、酶聯免疫分析法等。雖然上述方法靈敏度高、準確性好，能夠定量檢測食品中甲硝唑的殘留量，但是對實驗設備及操作人員的要求高，不適用于現場快速檢測。

實用新型內容

本實用新型提供一種現場快速檢測甲硝唑的免疫膠體金試劑卡可用于檢測甲硝唑的殘留，檢測樣品可為蜂產品、水產品、雞蛋、奶制品等。本實用新型試劑卡靈敏度高、特異性好、重復性好、檢測時間短，適用于現場快速檢測。

本實用新型試劑卡包括底板和塑料卡套，其特征在于所述底板由PVC板，以及依次黏貼在PVC板上的樣品墊、膠體金結合墊、硝酸纖維素膜、吸水材料墊組成，所述樣品墊、膠體金結合墊、硝酸纖維素膜、吸水材料墊首尾均有1～2mm的重疊，所述硝酸纖維素膜從樣品墊到吸水墊依次噴有相距5～6mm并與膠體金結合墊平行的檢測線和控制線，所述檢測線上包被有甲硝唑-牛血清白蛋白偶聯物，所述控制線上包被羊抗鼠IgG。

進一步，塑料卡套正面設置有加樣孔與觀察區，所述加樣孔呈漏斗狀，所述塑料卡套內具有固定底板的凹槽，通過卡槽與卡突結合來固定底板。

進一步，加樣孔對應的是底板上的樣品墊，觀察區對應的是底板上的硝酸纖維素膜，所述加樣孔與觀察區的長度與寬度分別略小于樣品墊和硝酸纖維素膜。

進一步，樣品墊由玻璃纖維制成，膠體金結合墊由玻璃纖維或聚酯膜制成，吸水材料墊為濾紙。

進一步，膠體金結合墊上包被有抗甲硝唑單克隆抗體-膠體金結合物。

本實用新型試劑卡利用抗體免疫競爭原理，通過抗原與金標抗體的顯色反應特異性檢測樣品中甲硝唑的殘留。當樣品溶液中有甲硝唑殘留時，甲硝唑先與膠體金顆粒上的特異性抗體結合。因此當膠體金顆粒隨樣品擴散至檢測線時，由于膠體金顆粒上特異性抗體的活性位點被樣品中的甲硝唑占據而無法與檢測線上甲硝唑特異性抗原結合；當樣品中甲硝唑殘留量超出試劑卡的檢出限時，檢測線顯色較控制線淺或者不顯色，判斷結果為陽性。當樣品中甲硝唑殘留量低于試劑卡檢出限時，檢測線顯色較控制線深，判斷結果為陰性。

本實用新型試劑卡各部分作用如下：

樣品墊、膠體金結合墊、硝酸纖維素膜、吸水材料墊首尾均有部分重疊可以做到更快速的層析。

檢測線與控制線與膠體金結合墊平行可以使樣品在層析過程中充分與檢測線、控制線上的抗原/抗體反應，實驗結果顯示更明顯。

加樣孔呈漏斗狀可以防止加樣過程中樣品液濺出而影響實驗結果。

加樣孔的長度和寬度略小于樣品墊可以放置樣品溶液滴出樣品墊外，觀察區的長度和寬度略小于硝酸纖維素膜可以防止外部雜質進入卡套腔內，并固定硝酸纖維素膜。

本實用新型具有如下有益效果：

(1)高靈敏度。本實用新型對蜂蜜中甲硝唑檢出限為1μg/kg，在同類檢測中達到了較優水平。

(2)高特異性。本實用新型以膠體金標記高親和力的單克隆抗體為基礎制備而成，對甲硝唑的交叉反應率為100％，具有高度專一性。

(3)操作簡單快速。本實用新型操作簡單且不依賴大型試驗設備，滴樣后3-5min即可用肉眼判斷硝酸纖維素膜上的檢測線和控制線顏色的深淺來讀取結果。

(4)成本低。本實用新型生產工藝簡單，流程成熟。生產成本低，投資少，收效快。

附圖說明