[實用新型]一種人p16蛋白的檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201720323879.2
• 申請日: 2017-03-30
• 公開（公告）號: CN206975044U
• 公開（公告）日: 2018-02-06
• 發明（設計）人: 蘇仲春;邵美云;駱偉明
• 申請（專利權）人: 廣州江元醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司11332
• 代理人: 鞏克棟,侯桂麗

技術領域

本實用新型屬于醫療器械領域，涉及一種人p16蛋白的檢測試劑盒。

背景技術

p16抑癌基因位于人類染色體9p21短臂上，屬于INK4類細胞周期抑制因子的成員之一。p16蛋白能結合細胞周期蛋白依賴性激酶4(CDK4)和6(CDK6)，并維持視網膜母細胞瘤基因產物pRb蛋白持續處于低磷酸化高活性狀態。pRb則能結合E2F轉錄因子并阻止G1期進入S期的細胞周期進程。p16蛋白在衰老細胞中的表達有所增加。p16蛋白過表達在這種情況下會最終可促進細胞的死亡和凋亡。在大多數非人乳頭瘤病毒(HPV)感染相關的腫瘤，包括結腸癌、乳腺、胰腺、黑素瘤和與吸煙密切相關的頭頸部癌中，p16基因都出現了缺失、突變或表觀遺傳沉默而導致喪失功能。因此，p16蛋白免疫組化檢測在這些腫瘤中的結果通常是陰性的。

而在HPV感染相關的腫瘤中則截然相反。HPV病毒感染后整合入宿主細胞基因組中，導致E6和E7病毒癌蛋白的產生。E6能降解p53并防止細胞凋亡。E7則功能性地滅活pRb，從而阻止pRb結合E2F轉錄因子。pRb作為正反饋回路的關鍵一環，反過來導致p16在細胞核和細胞質中的表達量增加，結果能通過p16蛋白免疫組化實驗檢測到。最近的研究表明，轉錄活性高的HPV可導致非常高水平的p16表達。低風險HPV病毒編碼的E7蛋白在某些生物化學和生物學性質方面均不同于高風險HPV編碼的，結果是在感染低風險HPV病毒的細胞中未觀察到p16蛋白積累表達。鑒于以上的結果，通過免疫組化檢測到的p16蛋白過表達可以作為鑒定腫瘤中高危HPV感染的敏感標記。然而，研究表明p16也在許多其他癌癥中表達，例如脂肪肉瘤、胃腺癌、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、肺腺癌、神經內分泌癌和非HPV感染機制導致的子宮癌等。基因缺失、點突變、功能突變或者Rb通路失調導致pRb的失活是這些非HPV感染腫瘤高表達p16蛋白的主要原因。所以，用免疫組化技術檢測p16表達對于診斷以上癌癥具有重要的參考意義。

免疫組織化學是利用抗體能特異性結合抗原的特性，再通過抗體上標記物的顯色，來檢測或者定位組織或細胞中的某種蛋白質物質的技術。但是，常規的免疫組織化學技術實驗耗時長，整個實驗至少需要數小時才能完成，導致用免疫組化技術檢測p16表達不能及時、快速、有效地得到結果，阻礙了其診斷癌癥的臨床應用。

目前，人p16蛋白的快速檢測試劑盒尚未見有相關專利，制備一個能夠對人p16蛋白進行快速檢測的試劑盒就顯得尤為重要。

實用新型內容

本實用新型的目的在于提供一種人p16蛋白的檢測試劑盒，該試劑盒檢測時間短，并能提供準確的檢測結果。

為達到此實用新型目的，本實用新型采用以下技術方案：

一方面，本實用新型提供一種人p16蛋白的檢測試劑盒，包括盒體以及與盒體相連的翻蓋式盒蓋，所述盒體內具有放置試劑瓶的凹槽和位于下凹槽上的試劑瓶，所述盒內設有8個試劑瓶和1個粉狀試劑槽1，所述8個試劑瓶從盒體的左側面到右側面分為三列，其中，位于左側面的一列包含3個試劑瓶，位于右側面的一列包含3個試劑瓶，位于中間的一列包含2個試劑瓶，所述粉狀試劑槽1固定于盒體內的后側面。

本實用新型中，與盒蓋相連的側面記為后側面，與所述后側面相對的側面為前側門，所述前側門左邊的側面為左側面，所述前側門右邊的側面為右側面。

優選地，所述位于左側面的一列從前到后依次為即用型抗p16蛋白一抗試劑的試劑瓶4、即用型封閉液的試劑瓶3和即用型過氧化物酶抑制劑的試劑瓶2。

本實用新型中，所述“即用型”為可以無需稀釋或調整配比，直接用于檢測的試劑。

優選地，所述位于右側面的一列從前到后依次為即用型蘇木素染色液的試劑瓶7、即用型HRP標記的二抗試劑的試劑瓶6和反應增強液的試劑瓶5。

本實用新型中，所述“HRP”為辣根過氧化物酶。

優選地，所述位于中間的一列從前到后依次為DAB濃縮液的試劑瓶8和DAB稀釋液的試劑瓶9。

本實用新型中，所述“DAB”為二氨基聯苯胺。

優選地，所述即用型抗p16蛋白一抗試劑的試劑瓶4、即用型封閉液的試劑瓶3、即用型過氧化物酶抑制劑的試劑瓶2、即用型蘇木素染色液的試劑瓶7、即用型HRP標記的二抗試劑的試劑瓶6、反應增強液的試劑瓶5和DAB濃縮液的試劑瓶8的容積為1ml。

優選地，所述DAB稀釋液的試劑瓶9容積為5ml。

優選地，所述粉狀試劑槽1用于放置PBS粉劑。

所述部分試劑可通過以下方法制備得到：