[實用新型]快速檢測單增李斯特菌的試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201720192862.8
• 申請日: 2017-03-01
• 公開（公告）號: CN206494935U
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發(fā)明（設計）人: 姚剛;張琦;蘇戰(zhàn)強;夏利寧;帕力達·亞森;劉英玉;鐘旗;鄭小鳳;張曉紅
• 申請（專利權）人: 新疆農業(yè)大學
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12Q1/04;C12R1/01
• 代理公司: 烏魯木齊博亞思知識產權代理事務所(普通合伙)65110
• 代理人: 王志剛

技術領域

本實用新型屬于食品快速檢測設施和設備的研發(fā)和設計技術領域，具體來講公開了一種快速檢測單增李斯特菌的商品代試劑盒。

背景技術

食源性致病菌的單核細胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes，LM）簡稱單增李斯特菌，對人類生命健康造成的極大的威脅。因其在 4℃～40℃ 都可以生長繁殖的這一特性，廣泛的存在于自然界，又被稱為“冰箱病”。近年來隨著對冷藏、速凍食品消費需求的快速增長，食品被 LM 污染的潛在風險性也隨之攀升，世界范圍內由 LM 污染引起的食物中毒情況也越來越高。最近的研究結果顯示：目前，LM 所造成的食品污染程度和感染病例已經遠勝于沙門氏菌。自 20 世紀 80 年代以來，加拿大、美國、瑞典、法國以及日本等國家已經數(shù)次次暴發(fā)了因 LM 引起的食物中毒事件，據(jù)調查，主要傳播媒介為果蔬和即食食品、奶制品、肉制品、水產品等。因此，為避免此類食品中毒事件發(fā)生，應在食品保藏與流通過程中加強對其進行實時監(jiān)控，快速而準確的檢測單增李斯特菌的消長情況。

目前，我國檢測單增李斯特菌主要以傳統(tǒng)檢測方法為主，但該法耗時較長，工作量大，且不能實現(xiàn)快速檢測。免疫血清學方法檢測該菌不但需要專門的技術，而且要用的單克隆抗體種類較少，價格貴，在一定程度上增加了檢測成本。分子生物學方法檢測單增李斯特菌雖然可以大大的減少工作量，縮短檢測時間，在一定程度上也實現(xiàn)了對該菌快速、靈敏、特異性的檢測，但操作過程中稍微不當，很容易出現(xiàn)假陽性以及假陰性的結果。因此，開發(fā)一種操作簡單、靈敏性高、特異性強且檢測成本低廉的商品級的試劑盒迫在眉睫。

發(fā)明內容

本實用新型的目的：設計一款試劑盒，這個試劑盒操作簡單，價格低廉，能快速針對單增李氏特菌進行檢測，并且能盡可能的做到粗定量或半定量的檢測。

本實用新型的技術方案：快速檢測單增李斯特菌的試劑盒，包括呈矩形的盒蓋和盒體，盒體內設置著呈白色的疏水材質制成的底板，所述盒蓋內卡接設置著吸管，所述吸管只標注著單位為20uL和25uL的刻度線；所述盒體內分成三個區(qū)域，從左至右分別是對照組區(qū)域、結果關系區(qū)域及反應區(qū)域，在對照組區(qū)域和反應區(qū)域內分別設置著底板，底板上分別凸出設有未加底物顯色物質的空白板及添加了底物顯色物質的顯色板，所述空白板與顯色板均呈圓形，直徑為6-8mm，所述空白板和顯色板均為親水材質制成，其吸液量為20-25uL；在結果關系區(qū)域內設有顯色顏色的深淺圖及將其轉化的菌液濃度與灰度值線性關系刻度表。

優(yōu)化設計，在結果關系區(qū)域內設有粘貼條形碼的條形框。

優(yōu)化設計，在菌液濃度與灰度值的線性關系刻度表上的數(shù)值旁設有勾選框。

優(yōu)化設計，所述的底物顯色物質為5-溴-4-氯-3-吲羥肌醇磷酸銨X-InP。

根據(jù)實踐得出的菌液濃度與灰度值的線性關系為y=0.076x-0.273，R²=0.955，其中Y為菌液濃度，X為灰度值。

有益效果：本試劑盒利用單增李斯特菌產生的特異性磷脂?；继禺愋粤字?C（PI-PLC）與其底物發(fā)生化學反應，產生變色反應為原理，以其操作簡單、高特異性及低廉的檢測成本等特點滿足對單增李斯特菌的快速檢測，可實現(xiàn)半定量或粗定量的快速檢測。

附圖說明

附圖1為本實用新型的主視結構示意圖。

具體實施方式

實施例1、快速檢測單增李斯特菌的試劑盒，包括呈矩形的盒蓋1和盒體2，盒體2內設置著呈白色的疏水材質制成的底板3，所述盒蓋1內側卡接設置著吸管7，所述吸管7只標注著單位為20uL和25uL的刻度線；所述盒體2內分成三個區(qū)域，從左至右分別是對照組區(qū)域、結果關系區(qū)域4及反應區(qū)域，在對照組區(qū)域和反應區(qū)域內分別設置著底板3，底板3上分別凸出設有未加底物顯色物質的空白板5及添加了底物顯色物質的顯色板6，所述空白板5與顯色板6均呈圓形，直徑為6-8mm，所述空白板5和顯色板6均為親水材質制成，其吸液量為20-25uL；在結果關系區(qū)域4內設有顯色顏色的深淺圖及將其轉化的菌液濃度與灰度值線性關系刻度表。

進一步，在結果關系區(qū)域內設有粘貼條形碼的條形框；在菌液濃度與灰度值的線性關系表刻度表上的數(shù)值旁設有勾選框。