[實用新型]一種分離核酸的試劑盒

有效

• 申請號: 201720169554.3
• 申請日: 2017-02-24
• 公開（公告）號: CN206512185U
• 公開（公告）日: 2017-09-22
• 發明（設計）人: 葉鋒;劉明坤;申大偉
• 申請（專利權）人: 北京旌準醫療科技有限公司
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00
• 代理公司: 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙)11419
• 代理人: 何自剛

技術領域

本實用新型涉及分子生物學和醫學技術領域，具體涉及一種分離核酸的試劑盒，特別涉及一種從血漿樣品中分離游離核酸的試劑盒。

背景技術

1970年，歐洲學者首次報道腫瘤病人的血漿或血漿中存在游離DNA，其含量為健康人群的10倍左右，其為雙鏈DNA分子，長度基本在500bp以下，大部分以核小體形式存在。大量研究證明，游離DNA與腫瘤基因組DNA具有相同的遺傳變異，例如，基因突變、基因啟動子甲基化等，因此，游離核酸可被用于一種預測腫瘤發生的新型標記物。存在于血漿或血清中來源于腫瘤細胞的游離DNA主要來源于：腫瘤細胞的凋亡、壞死釋放到血液中和腫瘤細胞的轉移、增殖釋放到血液中。

近年來，游離DNA研究成為基因組分子診斷研究的一個熱門領域，首先其可作為一種無創診斷方法，可以隨時采集患者樣本進行相關檢測分析。其次，其可作為一類新型生物標志物，因其具有與腫瘤細胞基因組相同的遺傳變異，具有顯著的特異性，可以對腫瘤進行分型及早期篩查。因此，循環游離DNA的檢測在臨床診斷上具有非常重要的應用價值，如癌癥早期篩查、腫瘤復發、療效監控等。游離DNA研究的主要障礙為：游離DNA的分離純化和高靈敏度檢測。因游離DNA在血液中的含量低，且片段長度短，為游離DNA研究帶來比較大的困難。

目前核酸提取方法主要有酚氯仿抽提、磁珠法和離心柱法。酚氯仿抽提因大量使用有毒溶劑，對操作者健康有一定危險。磁珠法提取核酸技術，其采用磁性納米顆粒，利用在高鹽低pH下吸附核酸，然后在低鹽高pH下分離核酸的原理進行樣本核酸的分離純化，但因其操作過于復雜，并且需要一定溫度下使用ProteinaseK進行孵育，同時需要多步洗滌等步驟，導致核酸提取的重復性差及提取效率低。離心柱法因其該方法簡單快速，無需有機提取，高效回收DNA和RNA碎片，能有效的去除樣本中的各種PCR抑制物，純化效率高、重現性好、產量高。

這樣目前就提出了一種從血漿中分離游離核酸的方法,包括如下步驟：

1)向血漿樣本中加入裂解緩沖液、Proteinase K、Acryl Carrier，混勻；

2)向步驟1)的得到的混合液中加二氧化硅基質膜離心柱，離心，棄廢液，將離心柱放回收集管中；

3)向步驟2)所得的離心柱中加入Wash BufferⅠ,離心，棄廢液，將吸附柱放回收集管中；

4)向步驟3)所得的離心柱中加入Wash BufferⅡ,離心，棄廢液，晾干離心柱，將離心柱放回收集管中；所述Wash BufferⅡ為CH3(CH2)nOH,n＝0-3；

5)向步驟4)所得離心柱加入洗脫緩沖液，室溫放置2-5min，離心，收集洗脫液，所得洗脫液即為分離的游離核酸，所述洗脫緩沖液包含三羥甲基氨基甲烷、EDTA。

要完成上述的方法，所述裂解緩沖液、Proteinase K、Wash BufferⅠ、洗脫緩沖液和Wash BufferⅡ這樣的反應液往往需要分開保存在不同的容器中，另外棄廢液要通過回收廢液的裝置回收廢液，且還需要離心管和二氧化硅基質膜離心柱這樣的處理裝置，然而目前這樣的容器、回收廢液的裝置以及處理裝置往往是各自以散件的形式來散亂的放置，這樣在使用的過程中會因為這些散件散亂的放置而沒有集中在一起，運作的時候很不方便并且影響效率，特別是要去偏遠的醫療條件不好的地區來從血漿樣品中分離游離核酸就更為嚴重，這樣的散件在攜帶和使用方面更不方便，于是就將所述容器、回收廢液的裝置和處理裝置放置在盒體里來方便攜帶，但是在盒體中的所述容器與回收廢液的裝置由于存放著試劑和廢液，在攜帶所述盒體在行走顛簸時常常發生傾斜從而無法保持所述容器與回收廢液的裝置的豎直狀態而使得所述容器與回收廢液的裝置也產生傾斜，這樣就會導致試劑的漏出所述容器與回收廢液的裝置之外而產生污損的缺陷。

發明內容

為解決上述問題，本實用新型提供了一種分離核酸的試劑盒，有效避免了現有技術中在攜帶所述盒體行走顛簸時常常無法保持所述容器與回收廢液的裝置的豎直狀態而產生傾斜的缺陷。

為了克服現有技術中的不足，本實用新型提供了一種分離核酸的試劑盒的解決方案，具體如下：

一種分離核酸的試劑盒，包括設有外周壁的盒體30和放置在該盒體中的容納容器和回收廢液的裝置的保存裝置31，所述保存裝置通過樞轉裝置32與所述外周壁樞轉連接，所述保存裝置的底部設有配重33使得所述試劑盒傾斜時該保存裝置仍保持水平位置。