[實用新型]一種新型便捷磁珠Emulsion?PCR儀有效
| 申請號: | 201720135648.9 | 申請日: | 2017-02-15 |
| 公開(公告)號: | CN206706110U | 公開(公告)日: | 2017-12-05 |
| 發明(設計)人: | 王博瑋;常子嵩;陳濤;張俊江 | 申請(專利權)人: | 天津歐德萊生物醫藥科技有限公司 |
| 主分類號: | C12M1/38 | 分類號: | C12M1/38 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 300457 天津市濱海新區天津經濟技術*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 新型 便捷 emulsion pcr | ||
技術領域
本實用新型涉及檢測儀器技術領域,具體為一種新型便捷磁珠Emulsion-PCR儀。
背景技術
PCR技術自1985年問世以來,已被廣泛應用于科學研究和臨床診斷,目前把單個DNA分子轉化成大量相同的DNA分子克隆所運用的技術還是PCR技術。克隆的優勢是可以把不同種類的DNA分子分別擴增并自然分離成不同群落,每個群落中包含數百萬個相同的拷貝。由于基因存在突變,傳統PCR用相同的引物所擴增的產物就不一定相同,想要達到相同克隆的目的,就需要把每個DNA分子分在不同的PCR管中進行PCR反應,但這相當困難,因為當模板量很小時,傳統PCR已經很困難,非特異性產物會占主導地位,也會出現大量的引物二聚體,特異性產物少,特異性差,甚至出現不能實現PCR過程,對單個DNA分子進行擴增就更加困難。
如果用傳統PCR擴增不同DNA分子,就會出現PCR反應短序列擴增偏好,而且會出現大量非特異性產物,這些非特異性產物來源于一些引物延伸不完全,在下一個循環結合另一個DNA分子,也有一些是不同的DNA分子雜交形成的。所以傳統PCR的實際靈敏度需要提高,因此有必要建立一種可以把單個PCR分子分離,并可以高效擴增的PCR方式。
Emulsion-PCR就是利用油包水技術,利用油包水將每個PCR反應分割成不同的水相,制成不同的PCR小室,在同一個的PCR反應程序中實現不同的PCR小室同時反應,大大降低了PCR反應中的非特異性概率,實現了單個DNA分子實現分隔,并高效擴增。單個DNA分子在自己的微環境中反應,排除了競爭性和污染性序列的影響。
在Emulsion-PCR的反應環境實現以后,為了更進一步降低PCR反應的非特異性干擾、反應環境對基因文庫的破壞,科研人員又把ePCR與Emulsion-PCR相結合,將引物結合在磁珠上,讓PCR反應在磁珠油包水中進行,PCR反應結束之后,油包水被破壞后,用結合在磁珠上的DNA建立文庫。
目前磁珠Emulsion-PCR技術已經運用于基因測序,定量分析以及實現難度較大的PCR擴增等研究之中。
但現有的技術大多只是通過反應之前的磁珠油包水乳液制備,然后利用傳統PCR儀進行擴增,使得實驗操作非常繁瑣;在油包水乳液制備時需要加入大量表面活性劑,使得實驗所需的離心管規格很大,但傳統PCR管又非常小,這樣就要求磁珠油包水乳液的制備需要混勻徹底,一般需要長時間高速攪拌,從而不可避免地出現外源DNA的污染和對DNA模板的物理性破壞,而且即使制備好了磁珠油包水乳液,在轉移到傳統PCR管的過程中也會非常不方便。而且傳統PCR儀并不能進行磁珠回收操作,也為實驗增加很多難度。
發明內容
(一)解決的技術問題
針對現有技術的不足,本實用新型提供了一種新型便捷磁珠Emulsion-PCR儀,解決了磁珠油包水的制備、混勻、轉移中會出現的問題,以及磁珠回收操作,簡化了實驗操作,從而提高了實驗特異性與準確性。
(二)技術方案
為實現以上目的,本實用新型通過以下技術方案予以實現:一種新型便捷磁珠Emulsion-PCR儀,其特征在于:該新型便捷磁珠Emulsion-PCR儀,包括儀器本體和儀器蓋,本體內放置進樣槽,進樣槽設置毛細管與磁珠槽相連,磁珠槽下方使用毛細管與電磁混勻模塊相連,電磁混勻模塊通過四向毛細管分別接入四個PCR加熱模塊,PCR加熱模塊與分離電磁裝置相連,通過Y型管分出兩個入口:PCR產物回收EP管槽與磁珠回收EP管槽。在本體正面設置調控模塊,調節PCR加熱模塊溫度。
優選的,所述的進樣槽與磁珠槽設置毛細管相連,磁珠槽下方使用毛細管與電磁混勻模塊相連
優選的,電磁混勻模塊通過四向毛細管分別接入四個PCR加熱模塊。
優選的,引PCR加熱模塊與分離電磁裝置相連,通過Y型管分出兩個入口:PCR產物回收EP管槽與磁珠回收EP管槽。
優選的,在本體正面設置調控模塊,調節PCR加熱模塊溫度。
(三)有益效果
本實用新型提供了一種新型便捷磁珠Emulsion-PCR儀。具備以下有益效果:該新型便捷磁珠Emulsion-PCR儀,通過對進樣槽的改良使水相、油相、表面活性劑可以分別按比例加入儀器,避免了人工操作步驟中可能造成的外源DNA污染以及對DNA的物理破壞。
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