[實(shí)用新型]一種破傷風(fēng)疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201720075463.3
• 申請(qǐng)日: 2017-01-20
• 公開（公告）號(hào): CN206387810U
• 公開（公告）日: 2017-08-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃晶;王諾;吳邊;曾強(qiáng);張薇;魏天河
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢生命科技股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京眾合誠(chéng)成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11246
• 代理人: 徐楊松

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種破傷風(fēng)疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒。

背景技術(shù)

破傷風(fēng)是由破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌引起的感染性細(xì)菌性疾病。

破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌可產(chǎn)生兩種外毒素，即破傷風(fēng)菌溶血素和破傷風(fēng)痙攣毒素。破傷風(fēng)菌溶血素與發(fā)病機(jī)制無(wú)關(guān)；破傷風(fēng)痙攣毒素又稱破傷風(fēng)毒素，可阻斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，引發(fā)肌肉強(qiáng)直和痙攣，亦即破傷風(fēng)的典型表現(xiàn)，破傷風(fēng)可在任何年齡發(fā)病，病死率在10％至70％之間，視治療措施、患者的年齡和總體健康而異；絕大多數(shù)破傷風(fēng)病例與生育相關(guān)，多發(fā)于發(fā)展中國(guó)家，主要見于不潔分娩和產(chǎn)后衛(wèi)生條件較差的新生兒和孕產(chǎn)婦；兒童和成人受傷后發(fā)生破傷風(fēng)也是一個(gè)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。

人體感染破傷風(fēng)桿菌后很少檢測(cè)出針對(duì)破傷風(fēng)毒素的抗體以及針對(duì)其他破傷風(fēng)桿菌抗原的抗體，人體內(nèi)的破傷風(fēng)毒素抗體只能通過(guò)被動(dòng)免疫或主動(dòng)免疫獲得。

破傷風(fēng)毒素經(jīng)化學(xué)滅活，其致病性消失，免疫原性保留，稱為破傷風(fēng)類毒素，破傷風(fēng)類毒素能在動(dòng)物或人體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生破傷風(fēng)毒素抗體(破傷風(fēng)抗毒素)，破傷風(fēng)抗毒素能中和體內(nèi)破傷風(fēng)毒素。

人源或馬源破傷風(fēng)抗毒素能有效預(yù)防、改善和治療破傷風(fēng)，近期接受人源破傷風(fēng)抗毒素被動(dòng)免疫的個(gè)體可檢測(cè)出破傷風(fēng)毒素抗體。

新生兒可通過(guò)胎盤獲得抗破傷風(fēng)毒素母?jìng)骺贵w，因此，母親在分娩前維持高滴度的抗體水平，能對(duì)新生兒提供足夠的抗新生兒破傷風(fēng)保護(hù)。

含破傷風(fēng)類毒素成分的疫苗能誘導(dǎo)人體產(chǎn)生破傷風(fēng)毒素抗體，使人體對(duì)破傷風(fēng)桿菌感染具有保護(hù)力。在完成疫苗基礎(chǔ)免疫后，抗體一般可維持十年左右，因此，每隔十年進(jìn)行一次加強(qiáng)免疫，才能維持破傷風(fēng)抗毒素水平在最低保護(hù)水平之上。

根據(jù)世界衛(wèi)生組織破傷風(fēng)疫苗立場(chǎng)文件所述，如采用的是標(biāo)準(zhǔn)的ELISA技術(shù)，破傷風(fēng)類毒素IgG抗體(抗毒素)濃度達(dá)到0.1至0.2IU/ml，視為具有保護(hù)力。

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)破傷風(fēng)類毒素IgG抗體的方法主要有間接血凝試驗(yàn)、毒素中和抗體實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)(ELISA)等。

評(píng)價(jià)疫苗免疫效果最可靠的方法就是檢測(cè)接種者體內(nèi)血清中的特異抗體的含量。當(dāng)前市場(chǎng)上檢測(cè)破傷風(fēng)類毒素抗體的商品化試劑盒多采用酶聯(lián)免疫法和化學(xué)發(fā)光法，這些方法雖然靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確、化學(xué)發(fā)光試劑還可以對(duì)抗體進(jìn)行定量，但在實(shí)際操作上存在諸多不便，如步驟復(fù)雜、耗時(shí)較長(zhǎng)，還需使用特定的儀器設(shè)備；試劑盒需4℃保存；對(duì)樣品要求靜脈采血等，不易在基層普及運(yùn)用。

免疫膠體金快速診斷技術(shù)是建立在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、單克隆抗體技術(shù)和免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)基礎(chǔ)上，以膠體金為標(biāo)記物，利用特異的抗原抗體反應(yīng)放大反應(yīng)信號(hào),通過(guò)直接觀察就可以判定結(jié)果的新技術(shù)。該技術(shù)具有簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確和無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，在臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)、動(dòng)物醫(yī)學(xué)檢測(cè)、激素檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、藥物殘留和毒品快速檢測(cè)等諸多診斷領(lǐng)域迅速發(fā)展。目前，膠體金標(biāo)記快速檢測(cè)抗體的方法大體分為兩種：一種是將抗原標(biāo)金，待測(cè)抗體的抗體劃膜；另一種是將抗原劃膜，待測(cè)抗體的抗體標(biāo)金?，F(xiàn)有研究表明：因?yàn)榭贵w蛋白性質(zhì)較為穩(wěn)定，所以對(duì)抗體蛋白的膠體金標(biāo)記較為穩(wěn)定，上述第一種方法所述的抗原的膠體金標(biāo)記則存在頗多問(wèn)題，因?yàn)榭乖酁椴《绢?，性質(zhì)多樣，有的大小甚至比膠體金顆粒還大，且穩(wěn)定性較差，因此很難直接將抗原標(biāo)記在膠體金顆粒上；即使勉強(qiáng)能將抗原標(biāo)記上，也需要抗原達(dá)到極高的純度，而對(duì)抗原病毒的純化是一項(xiàng)難度較大、成本較高的工程；也有人尋找抗原的重組抗原來(lái)代替這些天然抗原，但是很多抗原很難尋到能替代的重組抗原，而且即使有，成本也是極高的，因此上述第一種方法的局限性比較高。上述的第二種方法是將抗原進(jìn)行劃膜，這種方法使用待測(cè)抗體的抗體進(jìn)行金標(biāo)記，可以避免抗原金標(biāo)記的問(wèn)題，但將抗原劃到膜上發(fā)生反應(yīng)，需要抗原具有較高的濃度和純度，這也增加了產(chǎn)品生產(chǎn)的成本和難度；另外將抗原劃到膜上，由于抗原穩(wěn)定性較差，很難長(zhǎng)時(shí)間保存，檢測(cè)試紙的有效期極短。這些都是限制抗體快速檢測(cè)類試劑盒快速發(fā)展的原因。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種破傷風(fēng)疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒，解決采用膠體金標(biāo)記時(shí)抗原的顆粒大，純度要求高以及采用抗原劃膜時(shí)，由于抗原穩(wěn)定性差，很難長(zhǎng)時(shí)間保存，檢測(cè)試紙的有效期極短的問(wèn)題。