[發(fā)明專利]一種改良水稻籽抗氧化能力的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711499313.6
• 申請(qǐng)日: 2017-12-31
• 公開（公告）號(hào): CN108165576A
• 公開（公告）日: 2018-06-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張國棟;劉佳音;吳潔芳;徐春瑩;葛旭娟;米鐵柱
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 青島袁米農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/82
• 分類號(hào): C12N15/82;C12N15/66;C12N15/12;A01H5/00;A01H6/46;A23L7/10
• 代理公司: 北京華仁聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11588
• 代理人: 李冰

1.一種改良水稻籽抗氧化能力的方法，其特征在于，通過提高水稻籽粒中蝦青素含量改良水稻籽的抗氧化能力。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述改良水稻籽抗氧化能力的方法，其特征在于，進(jìn)一步包括：將蝦青素蛋白基因的片段，用種子特異啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)，轉(zhuǎn)化水該基因在水稻，使稻籽粒中特異表達(dá)，以提高水稻籽粒中蝦青素含量。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述改良水稻籽抗氧化能力的方法，其特征在于，包括以下步驟：

A.構(gòu)建重組載體；

B.獲得轉(zhuǎn)基因植株；

C.收獲單株自交種子；

D.自交留種；

E.表型選擇。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述改良水稻籽抗氧化能力的方法，其特征在于，所述步驟進(jìn)一步包括：

A.構(gòu)建重組載體：從雨生紅球藻中分離的一段蝦青素蛋白基因片段，該片段由1005個(gè)堿基組成，編碼334個(gè)氨基酸；將其與種子特異表達(dá)啟動(dòng)子酶切連接到表達(dá)載體pCAMBIA1300上，構(gòu)建重組載體。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述改良水稻籽抗氧化能力的方法，其特征在于，所述步驟進(jìn)一步包括：

B.獲得轉(zhuǎn)基因植株；利用根癌農(nóng)桿菌LBA4404介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因方法將重組載體導(dǎo)入粳稻中，獲得轉(zhuǎn)基因植株。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述改良水稻籽抗氧化能力的方法，其特征在于，所述步驟進(jìn)一步包括：

C.收獲單株自交種子：利用PCR法對(duì)T0代轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行陽性檢測，通過Northern雜交檢測陽性轉(zhuǎn)基因植株中插入片段的表達(dá)，通過Real-time PCR的方法鑒定陽性轉(zhuǎn)基因植株插入片段的拷貝數(shù)，選擇含有單拷貝的插入片段、且正常結(jié)實(shí)的轉(zhuǎn)基因植株，收獲單株自交種子。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述改良水稻籽抗氧化能力的方法，其特征在于，所述步驟進(jìn)一步包括：

D.自交留種：將上述步驟C中選留的轉(zhuǎn)基因植株的種子自交，同樣利用Northern雜交和Real-time PCR方法鑒定后代中插入片段的表達(dá)和拷貝數(shù)，結(jié)合田間表現(xiàn)選擇表型穩(wěn)定、蝦青素表達(dá)量高和表現(xiàn)優(yōu)良的轉(zhuǎn)基因單株，自交留種。

8.一種食品，其特征在于，采用如權(quán)利要求1～7中任一項(xiàng)所述改良水稻籽抗氧化能力的方法直接或間接生產(chǎn)而成。

9.一種如權(quán)利要求1～7中任一項(xiàng)所述改良水稻籽抗氧化能力的方法在生產(chǎn)用于食用或食品加工的稻米中的應(yīng)用。

10.一種如權(quán)利要求1～7中任一項(xiàng)所述改良水稻籽抗氧化能力的方法在建立水稻品系中的應(yīng)用。