[發明專利]一種在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法

在審

• 申請號: 201711499048.1
• 申請日: 2017-12-31
• 公開（公告）號: CN108174784A
• 公開（公告）日: 2018-06-19
• 發明（設計）人: 張國棟;劉佳音;張書艮;丁錦燕;羅碧;修旺珊;米鐵柱
• 申請（專利權）人: 青島袁策生物科技有限公司
• 主分類號: A01H1/08
• 分類號: A01H1/08;A01H1/02;A01H4/00
• 代理公司: 北京華仁聯合知識產權代理有限公司 11588
• 代理人: 李冰

1.一種在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，包括以下步驟：

A、選擇性狀表現良好的粳型和秈型水稻做父本和母本進行剪穎去雄雜交；

B、雜交種染色體加倍；

C、異源多倍體初步鑒定；

D、篩選穩定品系；

E、多倍體穩定品系自交。

2.根據權利要求1所述在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，所述步驟A、選擇性狀表現良好的粳型和秈型水稻做父本和母本進行剪穎去雄雜交，進一步包括：根據父本盛花期時間，安排去雄時間，選取露出葉鞘2/3-4/5的母本稻穗，剪去劍葉，露出全穗，在陽光下檢查穗花發育情況，除去穗上部已經授粉花，留下中部小穗50-100個。

3.根據權利要求1所述在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，所述步驟A、選擇性狀表現良好的粳型和秈型水稻做父本和母本進行剪穎去雄雜交，進一步包括：留下之花，將花穎上部傾斜剪去，外穎部分應剪去多些，約三分之一，內穎宜少些，然后用小攝子從切口處伸入將六個雄蕊全部除去，去雄時，宜由上部小穗依次而下，以防花藥落在下部的小穗上；去雄完畢，即套上透明紙袋，紙袋下方折密，用回形針夾住。

4.根據權利要求1所述在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，所述步驟A、選擇性狀表現良好的粳型和秈型水稻做父本和母本進行剪穎去雄雜交，進一步包括：同時剪去其他未去雄的穗子。

5.根據權利要求1所述在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，所述步驟A、選擇性狀表現良好的粳型和秈型水稻做父本和母本進行剪穎去雄雜交，進一步包括：授粉時把正在開花的父本穗輕輕剪下2-3個，放入紙袋內用手振動，使花粉均勻落在母本柱頭上；授粉后把套袋口折好用回形針別牢，以免非父本的花粉落入，同時系上雜交掛牌。

6.根據權利要求1所述在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，所述步驟A、選擇性狀表現良好的粳型和秈型水稻做父本和母本進行剪穎去雄雜交，進一步包括：雜交后10天應把套袋上端口敞開，收獲時只收剪穎粒。

7.根據權利要求2所述在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，所述除去穗上部已經授粉花判斷方法包括：穎花基部有一個小黑影點著為已授粉花，穎花中部有一較大黑影點者為當天不能開的花，穎花頂端全是黑影者為當天將開的花。

8.根據權利要求1所述在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，所述步驟B、雜交種染色體加倍過程，進一步包括：

(1)將雜交種子去殼，挑選胚完整的用于接種；

(2)種子消毒；

(3)將接種有水稻種子的培養皿置于恒溫箱中光照培養；

(4)繼代培養誘導；

(5)愈傷組織分化培養；

(6)生根培養；

(7)煉苗移栽到大田。

9.根據權利要求1所述在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，所述步驟進一步包括：(2)將種子按照如下程序進行消毒：無菌水清洗3-5次，75％的乙醇消毒1.5min，之后用17％-20％次氯酸鈉消毒45min，再用無菌水清洗5次，每次3min。

10.根據權利要求1所述在多倍體水平選育二倍體水稻新種質的方法，其特征在于，所述步驟進一步包括：(4)15d后，將繼代出的愈傷組織進行第二次繼代培養，繼代時間為7-10d；之后用滅菌的NB液體培養基+秋水仙素浸泡，500mg/L秋水仙素，在70轉/分搖床上浸泡48h。