[發明專利]一種可穩定保存的肺癌融合基因檢測試劑盒的RNA質控品

有效

• 申請號: 201711498435.3
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN108085391B
• 公開（公告）日: 2021-01-19
• 發明（設計）人: 陳嘉昌;陳肖燕;柳俊;蔣圓玲;張瑤
• 申請（專利權）人: 廣州市金圻睿生物科技有限責任公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 梁順宜;宋靜娜

本發明公開了一種可穩定保存的肺癌融合基因檢測試劑盒的RNA質控品，所述RNA質控品包含以下組分：陽性參考品、陰性參考品和檢測限參考品。所述陽性參考品、陰性參考品和檢測限參考品中分別含有相應融合基因RNA、金精三甲酸銨鹽、防腐劑和苯丁抑制素鹽酸鹽；所述防腐劑選自甘氨酸、ε?聚賴氨酸或半胱氨酸。本發明提供的RNA質控品可以有效防止游離RNA的降解，為RNA提供穩定的環境，延長RNA的保存時間，同時具有制備成本低、性能穩定和易保存等優點，可有效地監控人員操作、儀器狀態以及試劑盒有效性等因素，極大地提高了檢測試劑盒的準確性和可靠性。

技術領域

本發明屬于基因檢測領域，具體涉及一種可穩定保存的肺癌融合基因檢測試劑盒的RNA質控品。

背景技術

肺癌是全世界范圍內發病率和死亡率最高的惡性腫瘤，嚴重危害人類健康。2012年全球腫瘤流行病統計數據顯示，全球每年的癌癥新發病例約1410萬例，死亡約820萬例，其中，肺癌發病為182.5萬例，死亡約159.0萬，居首位例。肺癌分為非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和小細胞肺癌，NSCLC占全部肺癌的80％左右。染色體重排和基因重排是惡性腫瘤中常見的遺傳學改變，2007年Soda等首次在肺癌患者體內發現棘皮動物微管相關類蛋白4(EML4)基因與間變性淋巴瘤激酶(ALK)的融合基因，該發現第一次證實了在NSCLC中存在基因融合。ALK融合基因作為一個新的癌基因參與NSCLC的發展過程，其發生率約為5％，針對ALK融合基因的靶向抑制劑吉非替尼、厄洛替尼、克唑替尼目前已經廣泛應用于NSCLC臨床治療。在NSCLC中還發現ROS1、RET融合基因。

在使用靶向抑制劑治療肺癌前，融合基因篩查已經成為一項重要且必須的指標。美國國立綜合癌癥網絡臨床實踐指南、歐洲腫瘤內科學會肺癌共識以及中國晚期非小細胞肺癌分子靶向治療專家共識均明確建議：NSCLC患者在接受治療之前應先檢測EGFR、ALK和ROS1基因，根據基因狀態決定相應的治療策略，并建議在條件許可下同時進行三個基因的檢測。

目前，檢測肺癌驅動的融合基因的方法主要包括熒光原位雜交技術(FISH)、免疫組織化學方法(IHC)和實時逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)。基于上述方法已研發出了多種肺癌融合基因檢測試劑盒，但是目前市面上并沒有經濟、有效、穩定和通用的肺癌融合基因檢測試劑盒的質控品銷售，且現有的RNA質控品類產品多具有不穩定、易降解和不易保存等缺點，而質控品又是衡量和評估一款試劑盒檢測準確性和穩定性等性能的重要方法和質量指標。

發明內容

基于此，本發明的目的之一在于克服上述現有技術的不足之處而提供一種可穩定保存的肺癌融合基因檢測試劑盒的RNA質控品，其制作成本低、性能穩定、易保存，可有效地監控人員操作、儀器狀態以及試劑盒有效性等因素，極大地提高了肺癌融合基因檢測的準確性和可靠性。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案為：一種可穩定保存的肺癌融合基因檢測試劑盒的RNA質控品，所述RNA質控品包含以下組分：陽性參考品、陰性參考品和檢測限參考品；

所述陽性參考品包含以下組分：所述肺癌融合基因RNA、金精三甲酸銨鹽、防腐劑和苯丁抑制素鹽酸鹽；

所述陰性參考品包含以下組分：非所述肺癌融合基因RNA、金精三甲酸銨鹽、防腐劑和苯丁抑制素鹽酸鹽；

所述檢測限參考品包含以下組分：所述肺癌融合基因RNA、非所述肺癌融合基因RNA、金精三甲酸銨鹽、防腐劑和苯丁抑制素鹽酸鹽，且所述肺癌融合基因RNA占總RNA的質量比為1～5％；

所述防腐劑選自甘氨酸、ε-聚賴氨酸或半胱氨酸。

優選地，所述陽性參考品、陰性參考品和檢測限參考品中金精三甲酸銨鹽、甘氨酸和苯丁抑制素鹽酸鹽的摩爾濃度為：金精三甲酸銨鹽100～500μM、甘氨酸80～180mM和苯丁抑制素鹽酸鹽20～60nM。