[發明專利]一種普利卡那肽的固相合成方法

在審

• 申請號: 201711495911.6
• 申請日: 2017-12-31
• 公開（公告）號: CN108003222A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 徐峰;蘇軍;谷海濤;周金玉;劉標;孫美祿
• 申請（專利權）人: 江蘇諾泰澳賽諾生物制藥股份有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 連云港潤知專利代理事務所 32255
• 代理人: 劉喜蓮

本發明涉及醫藥領域產品普利卡那肽的合成方法。該方法采用固液相相合成方法合成普利卡那肽，經過裂解直接獲得普利卡那肽粗品，經過純化得到產品。本發明先采用液相合成法合成六肽片段，利用酶促法將六肽片段偶聯至固相樹脂上，利用固相樹脂的假稀釋效應在固相樹脂上通過對Cys不同位置的保護基，直接完成兩個二硫環的選擇性合成，之后將其從樹脂上切割下來，直接進行純化。由于液相、固相同時開展合成，酶促合成大大提高了合成效率及合成收率，不僅極大的減少了廢水、廢有機溶劑、廢氣的產生，同時固液相合成大大降低了生產成本，提高了產品品質。

技術領域

本發明為多肽合成制備領域，特別涉及普利卡那肽的合成制備方法。

技術背景

普利卡那肽結構式如下：

H-Asn-Asp-Glu-Cys(1)-Glu-Leu-Cys(2)-Val-Asn-Val-Ala-Cys(1)-Thr-Gly-Cys(2)-Leu-OH-cyclic (4→12),(7→15)-bis(disulfide)

普利卡那肽由美國Synergy公司研發成功，并于2017年1月19日獲得FDA的批準，該藥是一種口服鳥苷酸環化酶C (GC-C)受體激動劑，可以在上消化道發揮作用以刺激分泌腸液，從而維持腸道功能正常。其氨基酸肽序為H-Asn-Asp-Glu-Cys(1)-Glu-Leu-Cys(2)-Val-Asn-Val-Ala-Cys(1)-Thr-Gly-Cys(2)-Leu-OH，其中序列的4號位與10號位，7號位與15號位分別形成兩對二硫環。主要用于治療便秘腸易激綜合癥(IBS-C)和慢性特發性便秘(CIC)，它是迄今第二個用于治療便秘的口服多肽藥物。當前關于該藥物的合成專利不多，主要有深圳翰宇藥業的CN201310209459.8和CN201310680490.X兩個專利，以及南京工業大學的一個制備專利CN201510104385.0。深圳翰宇藥業的兩個專利分別采用不同的固液相合成策略，雖然都采用的不同的側鏈保護劑，定向合成了兩對二硫鍵，但是由于采用了最后液相環化的方法，合成反應液的濃度受到極大限制，會產生大量的廢水，操作復雜麻煩，不適合產業化生產。南京工業大學采用了固相環化的方法，有所改進，但是純固相合成，需要高倍數物料投入，產生大量原材料的浪費，原子利用率極差，反應時間相對較長。本發明收率基本與現有文獻報道持平或略高于報道，但是總體時間成本，物料成本等大大降低，并且適用于工業化生產。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種新的普利卡那肽的固相合成方法，該方法合成效率高，物料成本大大降低，并且適用于工業化生產。

本發明所要解決的技術問題是通過以下的技術方案來實現的。本發明是一種普利卡那肽的固相合成方法，其特點是：先采用液相合成法合成六肽片段，利用酶促法將六肽片段偶聯至固相樹脂上，利用固相樹脂的假稀釋效應在固相樹脂上通過對Cys不同位置的保護基，直接完成兩個二硫環的選擇性合成，之后將其從樹脂上切割下來，直接進行純化。

本發明所述的一種普利卡那肽的固相合成方法，其進一步優選的技術方案步驟是：

A、片段縮合成各類普利卡那肽中間體：

(1)R-Asn(R1)-Asp(R2)-Glu(R2)-Cys(R1)-Glu(R2)-Leu-Cys(R1)-Val-Asn(R1)-Val-Ala-

Cys(R1)-Thr(R4)-Gly-Cys(R1)-Leu-R3的合成；

（2）利用樹脂的假稀釋效應完成R-Asn(R1)-Asp(R2)-Glu(R2)-Cys(R1)-Glu(R2)-Leu-