[發明專利]一種提高雞艾美爾球蟲卵囊孢子化效率的方法及其應用

在審

• 申請號: 201711495787.3
• 申請日: 2017-12-31
• 公開（公告）號: CN108102919A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 安同偉;史曉華;趙金羽
• 申請（專利權）人: 天津赫萊恩特生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/10
• 分類號: C12N1/10;C12N3/00;C12R1/90
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種提高雞艾美爾球蟲卵囊孢子化效率的新方法，具體涉及一種通過控制卵囊濃度、液面高度和氧氣濃度來提高的雞艾美爾球蟲卵囊孢子化效率的方法，該方法能夠大大提高雞艾美爾球蟲卵囊孢子化的效率，降低人力物力投入，提高生產效率。

技術領域

本發明屬于獸用生物制品領域，尤其是一種提高雞艾美爾球蟲卵囊孢子化效率的方法。

背景技術

在雞球蟲疫苗的生產過程中，卵囊的孢子化培養是很關鍵的一個環節。原有的卵囊孢子化培養技術對卵囊濃度的要求，大大制約了其規模化的生產效率。為提高雞艾美爾球蟲卵囊的孢子化效率，科研人員進行了大量試驗性研究。

發明內容

本發明的目的在于提供一種提高雞艾美爾球蟲卵囊孢子化效率的新方法，該方法能夠大大提高雞艾美爾球蟲卵囊的孢子化效率，提高生產效率。

本發明是通過以下技術方法實現的：

一種提高雞艾美爾球蟲卵囊孢子化效率的方法如下：

(1)對收獲好的未孢子化卵囊液進行濃度測定。

(2)用試劑把未孢子化卵囊液的濃度調整為50-1000萬個卵囊/ml。

(3)把濃度為50-1000萬個卵囊/ml的未孢子化卵囊液倒入2000毫升燒杯中，液面高度控制在10-35cm。

(4)把通氧導管一端插入未孢子化卵囊液底部并固定好，另一端與氧氣流量計出氣端相連，氧氣流量計的進氣端與氧氣瓶相連。

(5)把連接好通氧導管的燒杯放入恒溫振蕩箱并固定，設定溫度為20-30℃，轉速為100r/min，開始孢子化培養。

(6)1h后打開氧氣瓶開關，把通氧量設定為1-5m3/1000ml/h，培養24h。

(7)24h后把通氧量設定為0.2-1m3/1000ml/h，繼續培養。

(8)培養48h后開始檢測孢子化率，每隔0.5h檢測一次，直至孢子化率合格可結束培養，把孢子化好的卵囊液裝入專用容器封口，即孢子化完成。

具體地，步驟2)所述的調整未孢子化卵囊液的濃度的試劑可以為2.5％重鉻酸鉀、0.05％-0.2％氯胺T或0.01％-0.5％氯胺B三者中任何一種。

具體地，步驟8)所述的孢子化率合格的標準為：孢子化率不低于80％。

本發明的優點及有益效果是：

本發明克服了傳統的雞艾美爾球蟲卵囊球蟲的孢子化效率低、人力物力要求高的缺陷，通過控制卵囊濃度、液面高度和氧氣濃度來提高的雞艾美爾球蟲卵囊孢子化效率的方法大大提高了雞艾美爾球蟲卵囊的孢子化效率，降低人力物力投入，提高生產效率。

具體實施例

對比實驗：

取60億個剛收獲的未孢子化柔嫩艾美爾球蟲卵囊，平分為三組，20億個/組。

組一：按常規孢子化技術進行孢子化培養，用0.2氯胺T調整卵囊濃度為40萬個/ml，共5000毫升，倒入2000ml燒杯中，液面高度2cm,需要25個2000ml燒杯，放入恒溫震蕩箱中培養，溫度28℃，轉速100r/min。48h后開始檢測孢子化率，直至孢子化率≥80％時結束。