[發(fā)明專利]水溶液中微量透明質酸的泡沫分離方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711495468.2
• 申請日: 2017-12-31
• 公開（公告）號: CN108250322B
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發(fā)明（設計）人: 邵文堯;謝若晗;陳玉清;崔書銘;滕飛雪
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應森

1.水溶液中微量透明質酸的泡沫分離方法，其特征在于包括以下步驟：

1)以天然表面活性劑椰子油皂苷作為起泡劑和捕集劑，確定泡沫分離采收HA的工藝條件；

2)單因素實驗步驟，具體步驟如下：

(1)檢查實驗裝置，確定無漏水、漏氣的現(xiàn)象；

(2)配制待分離的HA溶液：配制不同濃度的HA溶液，加入表面活性劑，用6mol/L和1mol/L NaOH溶液、6mol/L和1mol/L HCl溶液調節(jié)溶液pH值；

(3)在泡沫分離裝置的泡沫發(fā)生管中加入HA溶液，打開氣路閥門，調節(jié)壓力表和氣路流量計，氣泡由頂端流出，收集到燒杯中，殘液由排液口排出到收集瓶中；

(4)收集結束后的樣品封口，靜置消泡，測量泡沫液體積及殘液中的HA的濃度；

(5)根據(jù)所得數(shù)據(jù)計算回收率R與富集比E的值并作圖；

(6)清洗分離柱，先用自來水充分洗凈，再用蒸餾水沖洗數(shù)次、干燥；

3)正交試驗步驟，具體方法如下：

在單因素試驗的基礎上，設計并進行正交試驗，對實驗結果進行直觀和顯著性分析，確定各因素對HA回收的影響程度，確定最佳工藝條件，進行驗證試驗，得到最佳收集率和富集比；所述正交試驗的因素包括溶液pH值、空氣流速mL/min、加液量mL、溶液CAPB濃度g/L；

4)分析方法如下：

(1)溶液HA分離效果評價指標

HA的提取效果采用富集比、收集率為評價指標，如下公式1、公式2所示；

收集率：R(％)＝C_fV_f/C₀V₀×100％ (公式1)

富集比：E＝C_f/C₀ (公式2)

其中，C₀、C_f為原料液、提取泡沫液中透明質酸的濃度；V_f、V₀分別為原料液、提取泡沫液的體積；

(2)溶液中HA的濃度的測定

試驗采用改良CTAB濁度法測定溶液中的透明質酸的濃度，具體步驟如下：

a.配制濃度為2.5g/L的CTAB溶液：稱取0.25g固態(tài)CTAB溶解于100mL0.5mol/L氫氧化鈉溶液，每次使用時現(xiàn)配現(xiàn)用；

b.配制乙酸緩沖液：準確稱取1.640g醋酸鈉固體和0.8766g氯化鈉固體，加蒸餾水溶解，轉移至100mL容量瓶中，定容，配制成0.2mol/L醋酸鈉，0.15mol/L氯化鈉溶液，用乙酸調節(jié)pH至6.0；

c.繪制標準曲線：配制HA初始濃度為0-400mg/L的標準溶液，移液槍移取300μLHA溶液、700μL乙酸緩沖液和2mL 2.5g/L CTAB溶液；于室溫下混合5min，用紫外分光光度計測其在400nm下的OD值；以HA終濃度為橫坐標，OD₄₀₀nm為縱坐標繪制標準曲線，改良CTAB法的擬合曲線為y＝73.73x-0.4171，線性相關系數(shù)達到R²＝0.99299。