[發明專利]一種負載功能型微生物的營養緩釋填料及其應用

有效

• 申請號: 201711493925.4
• 申請日: 2017-12-31
• 公開（公告）號: CN108220278B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發明（設計）人: 成卓韋;陳建孟;於建明;陳東之;葉杰旭;徐丹華
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;B01D53/85
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

1.一種負載功能型微生物的營養緩釋填料，其特征在于所述填料按如下方法制備：將多孔海藻酸鹽凝膠浸入微生物菌體與無機鹽培養液制成的混懸液中，25-30℃、60-120 rpm振蕩0.5-1.5h，取出多孔海藻酸鹽凝膠用無機鹽培養液洗滌，去除表面未牢固吸附的菌體，重復洗滌2-4次，然后在30℃風干24-48h，即得負載功能型微生物的營養緩釋填料；所述多孔海藻酸鹽凝膠在浸入微生物菌體與無機鹽培養液制成的混懸液前，先置于鏤空殼體中形成填料載體，然后再負載微生物；所述鏤空殼體為兩個直徑為15mm的PE管圓環交叉形成的鏤空殼體；所述多孔海藻酸鹽凝膠按如下方法制備：將海藻酸鈉溶于無機鹽培養液制成海藻酸鈉溶液，將海藻酸鈉溶液在4℃冷凍至呈粘稠狀后，在其表面噴灑CaCl₂水溶液a直至形成膜后，再以玻璃棒引流的方式緩慢加入CaCl₂水溶液b，4℃冷凍形成凝膠，最后經過-81℃冷凍干燥形成多孔結構，獲得多孔海藻酸鹽凝膠。

2.如權利要求1所述負載功能型微生物的營養緩釋填料，其特征在于所述微生物菌體為曲霉菌和短黃桿菌的混合。

3.如權利要求1所述負載功能型微生物的營養緩釋填料，其特征在于所述微生物菌體為曲霉菌HD2和短黃桿菌L2擴大培養后的菌體以等蛋白量混合；所述曲霉菌HD2保藏編號CCTCC NO. M 2014531；所述短黃桿菌L2保藏編號CCTCC NO. M 209250。

4.如權利要求1所述負載功能型微生物的營養緩釋填料，其特征在于所述海藻酸鈉溶液濃度為5~30g/L，所述CaCl₂水溶液a和CaCl₂水溶液b濃度均為0.1-0.4 mol/L，所述海藻酸鈉溶液體積與CaCl₂水溶液a和CaCl₂水溶液b的總體積比為2-5:1。

5.如權利要求3所述負載功能型微生物的營養緩釋填料，其特征在于所述混懸液按如下方法制備：

（1）將斜面上保存的曲霉菌HD2接種于加有終濃度100 mg/L乙酸丁酯的改良型PDA培養基，在30℃培養3-5 d后，將上述培養液離心后獲得菌體，然后添加滅菌后的無機鹽培養液清洗2-3遍，離心取沉淀，獲得曲霉菌HD2菌體；所述PDA培養基組成為：土豆 200g/L，葡萄糖20g/L，溶劑為蒸餾水，pH值自然；所述無機鹽培養液組成為：K₂HPO₄·3H₂O 0.942 g·L^-1，KH₂PO₄ 0.234 g·L^-1，NaNO₃ 1.7 g·L^-1, NH₄Cl 0.98 g·L^-1，MgCl₂·6H₂O 0.2033 g·L^-1，CaCl₂·2H₂O 0.0111 g·L^-1，FeCl₃ 0.0162 g·L^-1，微量元素母液 5 mL·L^-1，溶劑為蒸餾水，pH=7.0-7.2；所述微量元素母液組成為：ZnCl₂ 88 mg·L^-1，MnCl₂·4H₂O 60 mg·L^-1，KI10 mg·L^-1，Na₂MoO₄·2H₂O 100 mg·L^-1，H₃BO₃ 50 mg·L^-1，溶劑為蒸餾水；

（2）將斜面上保存的短黃桿菌L2接種于加有終濃度100 mg/L乙酸丁酯的LB液體培養基，在30℃培養3-5d后，將上述培養液離心后獲得菌體，然后添加滅菌后的無機鹽培養液清洗2-3遍，離心取沉淀，獲得短黃桿菌L2菌體；

（3）將曲霉菌HD2菌體和短黃桿菌L2菌體以相同蛋白質含量混合均勻后，用無機鹽培養液重懸，輕微振蕩后得到混懸液。

6.一種權利要求1所述負載功能型微生物的營養緩釋填料在處理揮發性有機廢氣中的應用。