[發(fā)明專利]一種油田硫化氫產(chǎn)生菌培養(yǎng)基及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711493914.6
• 申請日: 2017-12-31
• 公開（公告）號: CN107937272B
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 史榮久;趙峰;張穎;韓斯琴
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院沈陽應(yīng)用生態(tài)研究所
• 主分類號: C12N1/00
• 分類號: C12N1/00;C12N1/02;C12Q1/06
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎;周秀梅

本發(fā)明屬于環(huán)境微生物學(xué)、微生物檢測與數(shù)量監(jiān)測領(lǐng)域，涉及一種適用于有效滿足硫化氫產(chǎn)生菌生長、促進(jìn)其代謝與繁殖的培養(yǎng)基配方成分及其應(yīng)用。本發(fā)明培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基溶液、微量元素液、維生素液等組成，還包含有復(fù)合的有機(jī)碳源、硫源等營養(yǎng)成分。在厭氧條件下，取適量體積的厭氧采集的油田環(huán)境水樣品(如采出水等)接種至上述培養(yǎng)基中，在與環(huán)境樣品原位溫度相同的條件下厭氧培養(yǎng)，可高效促進(jìn)樣品中具有產(chǎn)硫化氫能力的多種微生物生理類群的生長和代謝。使用本培養(yǎng)基，同時結(jié)合其他厭氧微生物學(xué)方法，可以有效實現(xiàn)油田環(huán)境或其他環(huán)境來源的樣品中硫化氫產(chǎn)生菌的菌種富集、分離篩選和微生物數(shù)量檢測與監(jiān)測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于環(huán)境微生物學(xué)、微生物檢測與數(shù)量監(jiān)測領(lǐng)域，涉及一種適用于有效滿足硫化氫產(chǎn)生菌生長、促進(jìn)其代謝與繁殖的培養(yǎng)基配方成分及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

就石油開采等工業(yè)行業(yè)而言，由于微生物生長繁殖而產(chǎn)生的硫化氫(H₂S)為工業(yè)生產(chǎn)帶來諸多危害：(1)H₂S可對人員的人身健康甚至生命安全產(chǎn)生危害。當(dāng)H₂S濃度較高(50～200ppm)時，該氣體使人體器官因缺氧而中毒；濃度極高(700～2000ppm)時，只需要幾秒鐘就會使人失去自救能力，如不及時搶救將死亡；(2)能夠產(chǎn)生H₂S的微生物還可引起石油工業(yè)管線的微生物腐蝕，既能造成較大經(jīng)濟(jì)損失，又可引發(fā)安全和生產(chǎn)事故；(3)高濃度的H₂S氣體會降低石油、天然氣的經(jīng)濟(jì)價值；(4)產(chǎn)H₂S微生物還可引發(fā)油藏地層堵塞，致使石油開采難度增大、開發(fā)成本提升。因此，有效檢測油田環(huán)境中硫化氫產(chǎn)生菌的數(shù)量，監(jiān)測其數(shù)量變化對于油田開發(fā)工業(yè)企業(yè)具有重要價值。

長期以來，油田企業(yè)用于檢測硫化氫產(chǎn)生菌的培養(yǎng)基僅針對硫酸鹽還原菌。但是，最新的許多研究表明，在油田等環(huán)境中生存著多種能夠產(chǎn)生H₂S的“非硫酸鹽還原菌”，這些微生物不能利用硫酸鹽產(chǎn)生H₂S，但是能夠利用諸如亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽、單質(zhì)硫等產(chǎn)生H₂S。因此，包括硫酸鹽還原菌在內(nèi)，這些微生物種群統(tǒng)稱為硫化氫產(chǎn)生菌。目前，還缺乏適用于多種硫化氫產(chǎn)生菌的培養(yǎng)基。顯然，油田企業(yè)所用的硫酸鹽還原菌的培養(yǎng)基將低估油田環(huán)境中的硫化氫產(chǎn)生菌的真實數(shù)量，進(jìn)而影響石油開采過程中的水質(zhì)管理及有關(guān)危害防控技術(shù)研發(fā)與決策。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種能夠有效滿足多種硫化氫產(chǎn)生菌生長繁殖的培養(yǎng)基配方成分，可實現(xiàn)包括硫酸鹽還原菌在內(nèi)的多種硫化氫產(chǎn)生菌的富集培養(yǎng)、分離篩選、數(shù)量檢測等應(yīng)用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一種油田硫化氫產(chǎn)生菌培養(yǎng)基，每1000mL硫化氫產(chǎn)生菌的培養(yǎng)基成分為：基礎(chǔ)培養(yǎng)基溶液924.0～961.7mL、碳源溶液1.0～10.0mL、生長因子兼氮源溶液1.0～10.0mL、硫源溶液1.0～10.0mL、微量元素液0.1～1.0mL、維生素液0.1～1.0mL、還原劑溶液5.0～8.0mL、pH緩沖液30.0～35.0mL、ST溶液0.1～1.0mL、瓊脂0～20g。

所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基液為每1000mL蒸餾水中含0.05～30.0g NaCl、0.05～5.0gMgCl₂·6H₂O、0.01～0.5g CaCl₂·2H₂O、0.05～10.0g Na₂SO₄、0.01～1.0g NH₄Cl、0.05～3.0g KH₂PO₄和0.05～5.0g KCl、0～10.0g MgSO₄·7H₂O、0～10.0g檸檬酸鐵銨。