[發明專利]氟苯尼考及甲砜霉素抗原、抗體及其同時檢測酶聯免疫分析方法

在審

• 申請號: 201711484698.9
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108250110A
• 公開（公告）日: 2018-07-06
• 發明（設計）人: 沈玉棟;李然;王弘;徐振林;林澤佳;楊金易;韋曉群;孫遠明
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C07C317/32
• 分類號: C07C317/32;C07K14/795;C07K14/765;C07K14/77;C07K16/44;G01N33/535;G01N21/33
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• 代理人: 任重

本發明公開了氟苯尼考及甲砜霉素抗原、抗體及其同時檢測酶聯免疫分析方法。本發明的一種半抗原FFM是通過氟苯尼考分子結構的芐羥基上衍生馬來酸半酯偶聯手臂得到，另一種半抗原FFD是在氟苯尼考分子芐羥基上衍生丁二酸半酯偶聯手臂得到，分別與載體蛋白偶聯得到氟苯尼考人工抗原作為包被原和免疫原；制備了檢測抗體，并建立了酶聯免疫檢測方法，對于氟苯尼考的IC₅₀=1.32 ng/mL，線性檢測范圍為0.29～5.91 ng/mL，對于甲砜霉素IC₅₀=2.13 ng/mL，線性檢測范圍為0.41～11.20 ng/mL，具有靈敏度高，特異性好等顯著優勢，可用于快速檢測食品中殘留的氟苯尼考及氟苯尼考胺，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及氟苯尼考及甲砜霉素檢測技術領域，更具體地，涉及一種氟苯尼考及甲砜霉素抗原、抗體及其同時檢測酶聯免疫分析方法。

背景技術

氟苯尼考(Florfenicol，C₁₂H₁₄Cl₂FNO₄S)及甲砜霉素(Thiamphenicol，C₁₂H₁₅Cl₂NO₅S)屬于氯霉素類廣譜抗生素，廣泛應用在水產養殖、畜牧、家禽疾病的治療等領域的。相對于氯霉素會給人體健康造成嚴重危害而被許多國家列為禁用藥物，氟苯尼考及甲砜霉素與氯霉素抗菌活性相似且用起來更安全。但是已有報道表明氟苯尼考具有一定的免疫毒性和胚胎毒性，甲砜霉素會引起動物再生障礙性貧血等，目前已有許多國家對其在動物組織中的最大殘留限量做了規定。氟苯尼考及甲砜霉素的不當使用及殘留會危害到人類的健康，因此加強對動物產品中氟苯尼考及甲砜霉素的檢測監控十分重要。

目前氟苯尼考及甲砜霉素的分析方法主要是儀器檢測方法，該方法準確可靠，常作為確證方法，但存在設備昂貴、需要專業人員、樣品通量低等不足。免疫檢測技術是基于抗原抗體特異性反應的分析方法，具有靈敏、快速、速高通量等特點，可與儀器確證技術搭配應對食品安全快速篩查需求，近年來已成為研究熱點。研究氟苯尼考及甲砜霉素的酶聯免疫檢測方法，對于氟苯尼考及甲砜霉素規模化樣品快篩和檢測具有非常重要的經濟和社會意義。

發明內容

本發明目的在于通過對氟苯尼考分子進行修飾改造，提供針對氟苯尼考及甲砜霉素檢測的半抗原及其相應的人工抗原和抗體。

本發明的第一個目的是提供一種氟苯尼考和/或甲砜霉素的半抗原。

本發明的第二個目的是所述半抗原在制備氟苯尼考和/或甲砜霉素的人工抗原中的應用。

本發明的第三個目的是提供一種氟苯尼考和/或甲砜霉素的人工抗原。

本發明的第四個目的是提供所述半原抗或所述人工抗原在氟苯尼考和/或甲砜霉素，或者制備氟苯尼考和/或甲砜霉素檢測試劑盒中的應用。

本發明的第五個目的是提供一種檢測氟苯尼考和/或甲砜霉素的免疫原與包被原組合，

本發明的第六個目的是提供一種檢測氟苯尼考和/或甲砜霉素的酶聯免疫檢測方法。

本發明的第七個目的是提供一種氟苯尼考和/或甲砜霉素的酶聯免疫檢測試劑盒。

為了實現上述目的，本發明是通過以下技術方案予以實現的：

一種氟苯尼考和/或甲砜霉素的半抗原，氟苯尼考分子芐羥基上衍生馬來酸半酯偶聯手臂，其結構式為：縮寫為FFM。

一種氟苯尼考和/或甲砜霉素的人工抗原，所述人工抗原為所述半抗原FFM與載體蛋白的偶聯物，其結構如下：

另一種氟苯尼考和/或甲砜霉素的半抗原，是在氟苯尼考分子芐羥基上衍生丁二酸半酯偶聯手臂所得，其結構式為：縮寫為FFD。