[發明專利]一種超聲波提取沙棘活性多肽的方法

在審

• 申請號: 201711482002.9
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108277248A
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發明（設計）人: 陳雨詩
• 申請（專利權）人: 磐安縣派普特生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16
• 代理公司: 北京華識知識產權代理有限公司 11530
• 代理人: 趙永強

本發明公開了一種超聲波提取沙棘活性多肽的方法，具體制備步驟為：將沙棘籽中加入吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖，初粉碎后超微粉碎得沙棘超微粉；向沙棘超微粉中加入蒸餾水、纖維素酶、植酸酶與單寧酶，水解，滅酶，離心，留取沉淀物質，干燥；向沙棘粉中加入蒸餾水、堿性蛋白酶、中性蛋白酶和左旋維生素C，超聲波輔助提取，滅酶，冷卻后的酶解液超濾得沙棘活性多肽粗液；將沙棘活性多肽粗液加入到色譜柱中，用雙蒸水洗脫，洗脫液加入到大孔樹脂柱，依次用雙蒸水和乙醇溶液洗脫，洗脫液干燥得沙棘活性多肽。有益效果為：本發明提取方法簡單可行，預處理時間短，沙棘活性蛋白純度高、提取率高，得到的沙棘活性多肽具有抗菌性和保水性。

技術領域

本發明涉及多糖技術領域，尤其是涉及一種超聲波提取沙棘活性多肽的方法。

背景技術

沙棘（Sea Buckthorn）又名醋柳，胡頹子科沙棘屬，是一種落葉性灌木。國內分布于華北、西北、西南等地。沙棘為藥食同源植物。沙棘的根、莖、葉、花、果，特別是沙棘果實含有豐富的營養物質和生物活性物質，可以廣泛應用于食品、醫藥、輕工、航天、農牧魚業等國民經濟的許多領域。沙棘果實入藥具有止咳化痰、健胃消食、活血散瘀之功效。現代醫學研究，沙棘可降低膽固醇，緩解心絞痛發作，還有防治冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的作用。沙棘籽渣為沙棘油加工生產后的廢棄物，通常只有少量用作飼料，大部分都是作為垃圾廢棄掉。而經過提取沙棘油的沙棘籽渣中的蛋白含量達27-30％，蛋白資源被浪費掉。但是由于沙棘籽中含有有較多的植酸和單寧類物質，可能會影響沙棘巧蛋白的消化吸收，所以要想利用這些蛋白，就應當對沙棘籽渣進行處理后再利用。將蛋白加工成多肽，不但能夠提高蛋白質在人體內的消化利用率而且產出的多肽會因選取蛋白質的不同而可能具有某種生理活性，所以利用沙棘籽渣廢棄物加工出促進生長發育、抗氧化及抑菌防腐的沙棘多肽。該沙棘多肽可應用于食品添加劑及飼料添加劑。水解沙棘蛋白制備多肽的方式多種多樣，主要有酸式水解、堿式水解、蛋白酶水解以及等電滲點解等工藝，隨著蛋白水解技術日益完善，將極大地促進蛋白產業的發展。

現有技術如授權公告號為CN 103421873 B的中國發明專利，公開了一種具有抑菌作用的沙棘籽多肽的制備方法，步驟包括：將沙棘籽渣經過浸泡處理后，用單寧酶、植酸酶組成的復合酶水解處理沙棘籽渣，再用酸性蛋白酶與木瓜蛋白酶聯合水解底物中的蛋白質，將多肽水解液低溫靜置過夜，然后通過低溫高速離心去除大分子雜質，離心上清液濃縮、干燥后得到沙棘籽抑菌多肽。體外抑菌培養試驗表明，此多肽對大腸桿菌、沙門氏菌等常見細菌都具有良好的抑制作用。該多肽口感好，沒有副作用，可以作為防腐劑添加到食品或飼料中使用。但是該多肽制備方法用時較長，提取效率低。

發明內容

本發明的目的在于提供一種提取方法簡單可行，預處理時間短，沙棘活性蛋白純度高、提取率高，得到的沙棘活性多肽具有抗菌性和保水性的超聲波提取沙棘活性多肽的方法。

本發明針對上述技術中提到的問題，采取的技術方案為：

一種超聲波提取沙棘活性多肽的方法，包括沙棘超微粉制備、沙棘超微粉預處理、超聲波輔助提取、分離純化，其具體制備步驟為：

沙棘超微粉制備：將沙棘籽中加入吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖，混合均勻，初粉碎至40-80目，然后超微粉碎至500-700目，即得沙棘超微粉，備用，上述吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖的添加量分別為沙棘籽重量的0.2-0.24‰和0.1-0.15‰，吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖的加入能夠防止沙棘蛋白在超微粉碎時發生變性，減小沙棘蛋白的損失，且吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖的存在可協助植酸酶與單寧酶快速識別植酸與單寧的位置，進而快速酶解除去沙棘中的纖維素、植酸和單寧類物質，減少沙棘超微粉預處理所需的時間，提高沙棘蛋白溶出率，經過初粉碎能夠為超微粉碎提供一定細度的原料，使超微粉碎更加容易進行，提高超微粉碎的工作效率，降低能耗，節約生產能耗和成本，超微粉碎能夠破壞沙棘籽的細胞壁，使細胞內蛋白質充分暴露出來，提高了沙棘籽多肽的提取速率；