[發(fā)明專利]杭椒辣椒素濃縮提取測(cè)定法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711477870.8
• 申請(qǐng)日: 2017-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108181397A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊靜;祝彪;龔翔宇;呂曉菡;陳建瑛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江農(nóng)林大學(xué);杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/74
• 代理公司: 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.杭椒辣椒素濃縮提取測(cè)定法，其特征是包括如下步驟：

1)、干燥：

以新鮮辣椒作為待測(cè)樣品，將待測(cè)樣品用液氮處理15～30秒后放入真空冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥，直至含水率≤0.5％；

2)、磨粉：

將步驟1)冷凍干燥后辣椒粉碎至過(guò)50目篩；

3)、提取：

按照1g/2～10ml的料液比，在步驟2)所得的辣椒凍干粉末中加入甲醇-四氫呋喃溶液，用超聲波儀提取5～30分鐘后離心；分別得上清液和沉淀；

所述甲醇-四氫呋喃溶液由甲醇、四氫呋喃按照1:1的體積比混合而得；

4)、濃縮：

于60±0.5℃恒溫水浴中，將步驟3)所得的上清液濃縮至原體積五分之一，得濃縮液；

5)、將辣椒素和二氫辣椒素的標(biāo)準(zhǔn)品用高效液相色譜-紫外檢測(cè)器進(jìn)行分析，從而獲得辣椒素的濃度與色譜峰面積的對(duì)應(yīng)關(guān)系以及二氫辣椒素的濃度與色譜峰面積的對(duì)應(yīng)關(guān)系；

6)、將步驟4)所得的濃縮液用高效液相色譜-紫外檢測(cè)器進(jìn)行分析，分析條件同步驟5)；從而獲得待測(cè)樣品中辣椒素和二氫辣椒素的色譜峰面積；

將上述色譜峰面積導(dǎo)入步驟5)所得的對(duì)應(yīng)關(guān)系中，從而獲得待測(cè)樣品中辣椒素和二氫辣椒素的濃度。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的杭椒辣椒素濃縮提取測(cè)定法，其特征是：

所述步驟5)和步驟6)中的高效液相色譜-紫外檢測(cè)器分析條件均為：

色譜柱：Hypersil ODS2 250×4.0mm，5μm；

流動(dòng)相：80％甲醇；

流速：0.8ml/min；

紫外波長(zhǎng)：280nm；

柱溫：30℃；

進(jìn)樣量：10μl。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的杭椒辣椒素濃縮提取測(cè)定法，其特征是：

所述步驟3)所得的沉淀替代辣椒凍干粉末，重復(fù)進(jìn)行步驟3)所述的提取2～4次；

將所有的提取液合并后進(jìn)行后續(xù)的步驟)。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的杭椒辣椒素濃縮提取測(cè)定法，其特征是：

真空冷凍干燥機(jī)的真空度為0.57～0.62mpa；冷凍溫度為-60～-55℃，冷凍干燥時(shí)間為≥72小時(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的杭椒辣椒素濃縮提取測(cè)定法，其特征是：

步驟2)所得的辣椒凍干粉于-20℃保存。

6.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的杭椒辣椒素濃縮提取測(cè)定法，其特征是：

所述步驟4)中，上清液濃縮后過(guò)0.45μm濾膜，得濃縮液。

7.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的杭椒辣椒素濃縮提取測(cè)定法，其特征是：

所述步驟3)的提取中，在30～40分鐘內(nèi)分三次在步驟2)所得的辣椒凍干粉末中加入甲醇-四氫呋喃溶液。