[發明專利]一種弧菌測試片及其制備方法

在審

• 申請號: 201711477727.9
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108220384A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 鄭森文;李其昌;陳善真;王志花;陳克宏;劉博奇;楊潔;王貴平
• 申請（專利權）人: 廣東海大畜牧獸醫研究院有限公司
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;C12Q1/20;C12R1/63
• 代理公司: 廣州市合本知識產權代理事務所(普通合伙) 44421
• 代理人: 譚啟斌

本發明公開了一種弧菌測試片，包括測試片主體、弧菌培養基以及水凝膠載體，弧菌培養基包括以質量百分數計算的以下組分：蛋白胨2.2?3.5％、蔗糖1.5?2.0％、牛膽粉0.2?0.4％、硫代硫酸鈉0.08?0.15％、檸檬酸鐵0.05?0.12％、麝香草酚藍0.002?0.005％、酵母1.0?1.5％、氯化鈉0.8?1.0％、去氧膽酸鈉0.12?0.2％、檸檬酸三鈉0.5?1.0％、溴麝香草酚藍0.002?0.004％、黃原膠0.1?0.3％、純水余量，弧菌培養基的pH值為9.0?9.3。本發明還公開了弧菌測試片的制備方法。本發明便于水體樣本在培養基中吸收和擴散，為弧菌的提供良好的生長環境。

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，更具體地說，涉及一種弧菌測試片及其制備方法。

背景技術

弧菌是中國對蝦育苗期間的常見菌，一旦蝦塘水質惡化，很容易導致細菌性疾病的流行。如果能對養殖水體中的細菌含量提前進行監測，如副溶血弧菌，溶藻弧菌的數量等，通過提前檢測，提前預警，及時采取措施，即可對弧菌的發病起到控制作用。

弧菌的檢測方法研究較多，也較深入，其中環介導等溫擴增(LAMP)技術、PCR(熒光定量、雙重實時、EMA-PCR、巢氏PCR、Real-time PCR)檢測技術主要用于其分子檢測及基因分型的研究、ELISA方法(間接法、斑點法、雙抗夾心法)，膠體金試紙條法均為基于其抗體的病原檢測方法，傳統的有細菌分離培養、生化鑒定等，但對致病菌的檢測特異性不高、靈敏度低、操作煩瑣耗時，也有利用快速酶促反應顯色培養基、自動化微生物分析儀進行鑒定的方法。

基于增菌技術的弧菌檢測片在食品的檢驗檢疫中應用較多，主要用于水產品、海產品及其腌、熟制品、水產調味品等的快速檢測，主要的生產廠家有美國3M公司，德國R-BIOPHARN公司，日本CHISSO公司，廣州綠洲生化。但目前市場上未見針對檢測水體內(池塘水、各類養殖水體)的弧菌的測試片，一種適用于監測水體中的弧菌(主要為副溶血弧菌和溶藻弧菌)，操作簡便的測試片，從而為水體內弧菌含量的預警，用藥前后效果比對提供技術手段。

現有測試片載體主要為濾紙，冷水可凝膠和無紡布三種，且對檢測效果有重要影響。以濾紙為載體的測試片濾孔過大，容易上下層都長菌，影響計數結果；無紡布為載體的測試片雖然具有使樣本擴散迅速的特點，但是無紡布的不透明性影響最終的計數結果。

發明內容

針對現有技術的上述缺陷，本發明的目的在于提供一種弧菌測試片；使弧菌培養基能長時間在室溫環境下保存，便于水體樣本在培養基中吸收和擴散，為弧菌的提供良好的生長環境，加快弧菌的生長速度。

為實現上述目的，本發明所采用的技術方案如下：

一種弧菌測試片，包括測試片主體、弧菌培養基以及水凝膠載體，所述弧菌培養基包括以質量百分數計算的以下組分：蛋白胨2.2-3.5％、蔗糖1.5-2.0％、牛膽粉0.2-0.4％、硫代硫酸鈉0.08-0.15％、檸檬酸鐵0.05-0.12％、麝香草酚藍0.002-0.005％、酵母1.0-1.5％、氯化鈉0.8-1.0％、去氧膽酸鈉0.12-0.2％、檸檬酸三鈉0.5-1.0％、溴麝香草酚藍0.002-0.004％、黃原膠0.1-0.3％、純水余量，所述弧菌培養基的pH值為9.0-9.3。

作為進一步的方案，本發明所述的測試片主體包括透明塑料底板和帶格子的透明塑料薄膜片，所述透明塑料底板上設有培養槽，所述透明塑料薄膜片的一側或一個角粘合固定在透明塑料底板表面，遠離透明塑料薄膜片與透明塑料底板固定處透明塑料薄膜片的一端延伸出揭膜端。

作為進一步的方案，本發明所述的水凝膠載體為冷水可凝膠，所述冷水可凝膠為黃原膠和瓜爾膠的水凝膠。

作為進一步的方案，本發明所述的水凝膠的質量濃度為0.2-0.8％，其中黃原膠和瓜爾膠的質量比為1:(1-2)。