[發明專利]一種核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體及其制備方法

在審

• 申請號: 201711475288.8
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108148867A
• 公開（公告）日: 2018-06-12
• 發明（設計）人: 曹詩林;古偉明;賴林浩;王曉君;梁世濠;楊冰娜
• 申請（專利權）人: 佛山科學技術學院
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87;C08G81/00;C08B37/08
• 代理公司: 廣東廣信君達律師事務所 44329
• 代理人: 楊曉松

1.一種核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體，其特征在于：包括磁性納米內核、包覆在磁性納米內核外的外殼1和外殼2，磁性納米內核和外殼1緊密配合，外殼1和外殼2緊密配合；磁性納米內核的材料為Fe₃O₄，外殼1的材料為殼聚糖(分子式為(C₆H₁₁NO₄)_m)，外殼2的材料為聚乙烯亞胺(分子式為(CH₂CH₂NH)_n)。

2.根據權利要求1所述的核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體，其特征在于：聚乙酰亞胺表面帶有強正電荷(zeta電位>20mV)，而磁性Fe₃O₄內核帶有強負電荷(zeta電位<-20mV)。

3.一種權利要求1或2所述的核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體的制備方法，其特征在于包括下述步驟：

(1)將可溶性的二價鐵鹽和三價鐵鹽、殼聚糖加入反應容器，采用溶劑充分溶解，然后加入試劑A進行反應，得到含有殼聚糖外殼1的磁性Fe₃O₄；

(2)將含有殼聚糖外殼1的磁性Fe₃O₄、聚乙烯亞胺(分子量為25kDa-750kDa)和戊二醛加入反應容器中，然后加入試劑B，攪拌反應，制得核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體。

4.根據權利要求3所述的核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，二價鐵鹽、三價鐵鹽和殼聚糖的摩爾質量比1:(1.5～2.5):(1～2)，其中二價鐵鹽、三價鐵鹽按鐵元素的摩爾質量計，殼聚糖按氨基葡萄糖殘基的摩爾質量計；二價鐵鹽為硫酸亞鐵、硝酸亞鐵、氯化亞鐵；三價鐵鹽為硫酸鐵、硝酸鐵、氯化鐵。

5.根據權利要求3所述的核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體的制備方法，其特征在于：步驟(1)，所述溶劑是1％乙酸溶液。

6.根據權利要求3所述的核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述試劑A是三聚磷酸鈉、水和氨水溶液。

7.根據權利要求3所述的核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，反應的溫度為60～90℃，反應的時間為0.5～3小時。

8.根據權利要求3所述的核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體的制備方法，其特征在于：步驟(2)中，試劑B是1-乙基-3-甲基咪唑鹽酸鹽。

9.根據權利要求3所述的核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體的制備方法，其特征在于：步驟(2)中，含有殼聚糖外殼1的磁性Fe₃O₄、聚乙烯亞胺的質量比為1:(1～2)；聚乙烯亞胺和戊二醛的質量比為1:(1～2)；1-乙基-3-甲基咪唑鹽酸鹽與三種物質(含有殼聚糖外殼1的磁性Fe₃O₄、聚乙烯亞胺、戊二醛)質量之和的比例為(5～100):1。

10.根據權利要求3所述的核殼結構的磁性殼聚糖聚乙酰亞胺納米基因載體的制備方法，其特征在于：步驟(2)中，攪拌反應的溫度為30～90℃，時間為0.1～24小時。