[發明專利]保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法

有效

• 申請號: 201711474223.1
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN107941800B
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: 葉菲菲;張娟娟;吳杰;賈夢虹;楊玲玲
• 申請（專利權）人: 上海微譜化工技術服務有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N30/02;G01N30/06;B01D71/74;B01D67/00
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1.保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，至少包括以下步驟：

S1：將原料蜂膠置于15℃以下進行粉碎制得碎蜂膠，加入體積濃度為95％的乙醇，攪拌溶解，制得蜂膠乙醇液；

S2：用目數為800-1000目的濾器進行過濾蜂膠乙醇液而制得蜂膠濾液，再將蜂膠濾液通過濾膜得精制蜂膠液，然后將精制蜂膠液減壓濃縮干，得到精制蜂膠；

S3：定性分析：取精制蜂膠與去離子水進行混合溶解，配制蜂膠溶液，然后加入顯色液，觀察顏色變化；

S4：定量分析：通過液相色譜檢測法檢測精制蜂膠，通過標準品對照得到保健食品中假蜂膠的定量分析；

其中，所述濾膜的制備原料包括葡聚糖、八(氨基苯基三氧硅烷)；

所述濾膜的制備方法如下：

(1)多孔葡聚糖凝膠制備：將葡聚糖凝膠用蒸餾水浸泡24h，用蒸餾水充分洗滌至中性，過濾，置于-12～-15℃迅速冷凍5h，取出后放入冷凍干燥箱內，冷凍干燥24h，得到多孔葡聚糖凝膠；

(2)酰氯化多孔葡聚糖凝膠：在反應器加入二氯甲烷、草酰氯、多孔葡聚糖凝膠，升溫至30℃，保溫反應3h，反應完畢后減壓濃縮干，取出后放真空干燥箱中干燥，得到酰氯化多孔葡聚糖；所述二氯甲烷與所述草酰氯、所述多孔葡聚糖凝膠的重量比為10：1：0.7；

(3)向反應器中加入乙腈、酰氯化多孔葡聚糖、八(氨基苯基三氧硅烷)，升溫至80℃，保溫反應14h，過濾，脫泡，得到制膜液；所述乙腈與所述酰氯化多孔葡聚糖重量比為6：1；將聚酯無紡布作為支撐層安裝在刮膜機上，調整好刮刀的厚度和線速控制儀的走布速度，將制備好的制膜液緩慢平穩地倒入制膜液儲存槽中，開動刮膜機，制膜液被涂刮在聚酯無紡布上，經過10cm的空氣暴露距離后，浸入到6℃的恒溫凝固浴中，后經過漂洗槽充分漂洗，得到濾膜。

2.根據權利要求1所述保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，所述體積濃度為95％的乙醇與所述原料蜂膠的重量比為(4-8)：1。

3.根據權利要求1所述保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，所述顯色液包括縮二脲顯色液、茚三酮顯色液、考馬斯亮藍G250顯色液中一種。

4.根據權利要求1所述保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，所述精制蜂膠與所述去離子水的重量比為1：(5-10)。

5.根據權利要求1所述保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，所述濾膜的制備原料中所述葡聚糖與所述八(氨基苯基三氧硅烷)的重量比為1：(0.05-0.2)。

6.根據權利要求5所述保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，所述濾膜的制備原料中所述葡聚糖與所述八(氨基苯基三氧硅烷)的重量比為1：0.16。

7.根據權利要求1所述保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，所述液相色譜檢測法的測試參數：

色譜柱：色譜柱采用改性聚酰胺為填料；流動相：以甲醇為流動相A，以質量分數為15％的磷酸溶液為流動相B，進行梯度洗脫：洗脫程序為：0-25min，甲醇20-40％；25-55min，甲醇40-55％；55-65min，甲醇55％；65-80min，甲醇55-75％；80-90min，甲醇75-20％；檢測波長：268nm；流速：1mL/min；柱溫：35℃。

8.根據權利要求7所述保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，所述改性聚酰胺為聚酰胺接枝七(6-氨基-6-去氧)-β-環糊精。

9.根據權利要求8所述保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，所述改性聚酰胺中聚酰胺接枝七(6-氨基-6-去氧)-β-環糊精的接枝率為1-5％。

10.根據權利要求1所述保健食品中假蜂膠的定性定量分析方法，其特征在于，所述標準品至少包括蘆丁、槲皮素、白楊素、高良姜素、p-香豆酸、阿魏酸中一種或多種。