[發明專利]一種單寧酶固態發酵培養基制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201711473917.3
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN107904219B
• 公開（公告）日: 2020-04-03
• 發明（設計）人: 吳昌正;肖安風;蔡慧農;倪輝;杜希萍;姜澤東;楊秋明;黃高凌
• 申請（專利權）人: 集美大學
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;C12R1/69
• 代理公司: 廈門律嘉知識產權代理事務所(普通合伙) 35225
• 代理人: 張輝;溫潔

1.一種單寧酶固態發酵培養基的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1固態發酵培養基原料預處理：取烘干或曬干的干板栗刺殼，粉碎后過30-50目篩；取篩下物備用；取烘干或曬干的高粱桿，扎成小段，粉碎后過10-30目篩，取篩下物備用；取烘干或曬干的小麥稈，截成長度為0.2-0.3cm的小段，備用；將板栗刺殼粉末、高粱桿粉末及小麥稈段按照質量比1:1:1-3:3:1的比例混合，充分攪拌均勻，讓小麥稈均勻分布在粉末中；

步驟2固體基質外加營養液制備：準備下述重量份的原料：

葡萄糖 10-30g，

單寧酸 5-15g，

玉米漿 3-8mL，

硫酸銨 10-30g，

將上述原材料完全溶解于1L去離子水中；調節營養液pH至5-6，獲得固體基質外加營養液；

步驟3培養料制備及滅菌：將混合均勻的板栗刺殼、高粱桿粉末及小麥稈碎段作為固體基質，固體基質與固體基質外加營養液按照質量體積比1:2-1:3，混合并攪拌均勻制備獲得培養料；培養料經滅菌后獲得單寧酶固態發酵培養基。

2.根據權利要求1所述的一種單寧酶固態發酵培養基的制備方法，其特征在于，步驟2中所述的pH為5.5。

3.根據權利要求1所述的一種單寧酶固態發酵培養基的制備方法，其特征在于，步驟3所述的滅菌方法為121℃高壓蒸汽滅菌10 min。

4.一種單寧酶固態發酵培養基的應用，其特征在于：采用權利要求1-3任一權利要求所述的單寧酶固態發酵培養基應用于單寧酶的制備，包括以下步驟：

步驟1：將產單寧酶絲狀真菌菌株打碎制備菌體懸液接入固態發酵培養基中，攪拌均勻；

步驟2：遮光，恒溫靜置培養，發酵后獲得單寧酶。

5.根據權利要求4所述的一種單寧酶固態發酵培養基的應用，其特征在于：所述的產單寧酶絲狀真菌菌株為米曲霉。

6.根據權利要求4所述的一種單寧酶固態發酵培養基的應用，其特征在于：步驟1中每15g單寧酶固態發酵培養基加入8 mL菌絲體懸液。

7.根據權利要求4所述的一種單寧酶固態發酵培養基的應用，其特征在于：步驟2中恒溫穩定為25-35℃，所述的發酵時間為72-120h。