[發明專利]一種利用生物酶合成1,3-丙二醇的方法

有效

• 申請號: 201711470812.2
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108048494B
• 公開（公告）日: 2021-08-10
• 發明（設計）人: 江會鋒;楊一群;劉玉萬;盧麗娜;馬延和
• 申請（專利權）人: 中國科學院天津工業生物技術研究所
• 主分類號: C12P7/18
• 分類號: C12P7/18;C12N9/88;C12N9/04;C12N15/60;C12N15/53
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;張立娜

1.DERA蛋白或所述DERA蛋白相關生物材料在合成1,3-丙二醇中的應用；

所述DERA蛋白為如下任一所示蛋白質：

(A1)氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質；

(A2)在(A1)所限定的蛋白質的N端和/或C端連接標簽后得到的融合蛋白；

所述DERA蛋白相關生物材料為能夠表達所述DERA蛋白的核酸分子，或含有所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組菌或轉基因細胞系。

2.(1)和(2)在合成1,3-丙二醇中的應用；

(1)DERA蛋白或所述DERA蛋白相關生物材料；

(2)yqhD蛋白或所述yqhD蛋白相關生物材料；

所述DERA蛋白為如下任一所示蛋白質：

(A1)氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質；

(A2)在(A1)所限定的蛋白質的N端和/或C端連接標簽后得到的融合蛋白；

所述DERA蛋白相關生物材料為能夠表達所述DERA蛋白的核酸分子，或含有所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組菌或轉基因細胞系；

所述yqhD蛋白為如下任一所示蛋白質：

(B1)氨基酸序列為SEQ ID No.5的蛋白質；

(B2)在(B1)所限定的蛋白質的N端和/或C端連接標簽后得到的融合蛋白；

所述yqhD蛋白相關生物材料為能夠表達所述yqhD蛋白的核酸分子，或含有所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組菌或轉基因細胞系。

3.一種合成的1,3-丙二醇方法，包括如下步驟：

(a1)以甲醛和乙醛作為底物，經DERA蛋白催化反應生成3-羥基丙醛；

(a2)以3-羥基丙醛作為底物，經yqhD蛋白催化反應生成1,3-丙二醇；

所述DERA蛋白為如下任一所示蛋白質：

(A1)氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質；

(A2)在(A1)所限定的蛋白質的N端和/或C端連接標簽后得到的融合蛋白；

所述yqhD蛋白為如下任一所示蛋白質：

(B1)氨基酸序列為SEQ ID No.5的蛋白質；

(B2)在(B1)所限定的蛋白質的N端和/或C端連接標簽后得到的融合蛋白。

4.一種合成的1,3-丙二醇方法，包括如下步驟：

(b1)以乙醇為底物經yqhD蛋白催化反應生成乙醛；

(b2)以乙醛和甲醛作為底物，經DERA蛋白催化反應生成3-羥基丙醛；

(b3)以3-羥基丙醛作為底物，經yqhD蛋白催化反應生成1，3-丙二醇；

所述DERA蛋白為如下任一所示蛋白質：

(A1)氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質；

(A3)在(A1)所限定的蛋白質的N端和/或C端連接標簽后得到的融合蛋白；

所述yqhD蛋白為如下任一所示蛋白質：

(B1)氨基酸序列為SEQ ID No.5的蛋白質；

(B2)在(B1)所限定的蛋白質的N端和/或C端連接標簽后得到的融合蛋白。

5.根據權利要求3或4所述的方法，其特征在于：在所述方法中，所述DERA蛋白和所述yqhD蛋白均是以粗酶液、粗酶液凍干粉、純酶或全細胞的形式發生催化作用的。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述粗酶液、粗酶液凍干粉和純酶均按照包括如下步驟的方法制備得到：在宿主細胞中表達所述DERA蛋白和/或所述yqhD蛋白，得到重組細胞；裂解所述重組細胞獲得所述粗酶液、粗酶液凍干粉或純酶。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述全細胞均按照包括如下步驟的方法制備得到：在宿主細胞中表達所述DERA蛋白和/或所述yqhD蛋白，得到的重組細胞即為所述全細胞。