[發明專利]一種快速培育落葉冬青組培苗的方法

有效

• 申請號: 201711469701.X
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108029559B
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發明（設計）人: 陳穎;陳茜;陳燕瓊;袁斌玲;魏子涵
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

1.一種快速培育落葉冬青組培苗的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）取經常規消毒、接種方法獲得的腋芽，進行初代培養，獲得1.5~2.0cm的無菌芽；將無菌芽剪切轉接入增殖培養基中，先培養產生少量叢生芽，然后以25d為繼代周期，將帶有5~6個小芽的芽叢再轉接入增殖培養基中，獲得大量的叢生芽；增殖培養基為：MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L 6-BA+1.0mg/L CPPU，

或MS+0.1mg/L NAA+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L CPPU +1.0mg/L GA，

或MS+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L CPPU；

2）將增殖培養后的落葉冬青叢芽轉接入壯苗培養基中，培養25d后，叢芽繼續增殖，且有效苗數量增加；壯苗培養基為：MS+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L CPPU+ 1.0GA；

3）剪取3.0cm以上的壯芽接種到生根誘導培養基中，15~25d后開始生根，培養35~45d后，再生植株長至5.0~6.0cm以上，小苗健壯；生根培養基為：1/2MS+1.0 mg/L IBA+1.0 g/LAC，或1/2MS+0.1 mg/L IBA+1.0 g/L AC；

4）待生根的小苗長至5.0~6.0cm以上、根8~10條時，將小苗進行煉苗、馴化移栽，成活后獲得組培苗。

2.根據權利要求1所述的快速培育落葉冬青組培苗的方法，其特征在于：步驟1）中，無菌腋芽是經常規消毒法選取落葉冬青春季嫩稍，剪取1.0cm帶芽莖段進行腋芽誘導培養20d，獲得的1.5~2.0cm左右的無菌芽。

3.根據權利要求1所述的快速培育落葉冬青組培苗的方法，其特征在于：步驟1）中，腋芽轉接增殖方法為：在超凈工作臺上用長鑷將帶腋芽莖段取出，在無菌條件下用將1.5cm左右的腋芽剪下，接種在增殖培養基上。

4.根據權利要求1所述的快速培育落葉冬青組培苗的方法，其特征在于：步驟1）中，叢芽轉接方法為：在超凈工作臺上用長鑷將叢生芽取出放置在經滅菌的濾紙上，在無菌條件下將叢生芽分割成帶有5~6個小芽的芽叢，接種到增殖培養基上。

5.根據權利要求1所述的快速培育落葉冬青組培苗的方法，其特征在于：步驟2）中，所述的壯苗培養方法為：將增殖后的叢生芽在超凈工作臺上用長鑷取出放置在經滅菌的濾紙上，在無菌條件下將叢生芽分割成3~4cm3大小，接種到壯苗培養基上。

6.根據權利要求1所述的快速培育落葉冬青組培苗的方法，其特征在于：步驟4）中，煉苗、馴化移栽為：煉苗時將封口膜打開，用帶孔的雙層塑料薄膜蒙閉，在室溫下煉苗2~3d，然后將小苗從瓶中取出洗去根部培養基，移入裝有珍珠巖：泥炭：蛭石=5:3:2基質的容器中，小苗上部用帶孔透明的塑料薄膜遮蓋，10d后去除；期間每隔2d補充一次水分，苗木成活后常規管理。

7.根據權利要求1所述的快速培育落葉冬青組培苗的方法，其特征在于：在增殖、壯苗以及生根培養基中，均含3.0 %蔗糖、0.65%瓊脂，pH5.8。

8.根據權利要求1所述的快速培育落葉冬青組培苗的方法，其特征在于：在增殖、壯苗以及生根階段，培養溫度為25±2℃，光照時間14h/d，光照強度55 μmol·m–2·s–1。

9.根據權利要求1所述的快速培育落葉冬青組培苗的方法，其特征在于：落葉冬青的品種為‘Winter Red’、‘Red Sprite’、‘Winter Gold’。