[發(fā)明專利]BRAF基因突變檢測的引物和探針及應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711469163.4 | 申請日： | 2017-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN108048569A | 公開（公告）日： | 2018-05-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 廖軍華;鄭群艷;葉滔 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣州譽嘉生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202 | 代理人： | 宋靜娜;郝傳鑫 |
| 地址： | 510670 廣東省廣州市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | braf 基因突變 檢測 引物 探針 應(yīng)用 | ||
1.BRAF基因突變檢測的引物，其特征在于，包括同時擴野生型基因和突變型基因的通用引物，以及只擴增突變型基因的突變引物，所述突變引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述通用引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示，所述BRAF基因突變?yōu)閏.1799T＞A。
2.如權(quán)利要求1所述的引物在制備用于檢測BRAF基因突變的試劑盒中的應(yīng)用。
3.BRAF基因突變檢測的探針，其特征在于，所述探針的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述BRAF基因突變?yōu)閏.1799T＞A。
4.如權(quán)利要求3所述的探針，其特征在于，所述探針的兩端分別標(biāo)記熒光報告基團和熒光猝滅基團，所述熒光報告基團選自于FAM、VIC、HEX、Cy
5.如權(quán)利要求3或4所述的探針在制備用于檢測BRAF基因突變的試劑盒中的應(yīng)用。
6.一種試劑盒，其特征在于，包含如權(quán)利要求1所述的引物和/或權(quán)利要求3所述的探針。
7.如權(quán)利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含RNA提取試劑、cDNA合成試劑和PCR反應(yīng)試劑。
8.如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR反應(yīng)試劑包含PCR緩沖液、dNTPs和DNA聚合酶。
9.如權(quán)利要求8所述的試劑盒，其特征在于，當(dāng)PCR擴增體系為20μL時，擴增體系含有以下組分：PCR混合液10μL、cDNA模板1μL、每條引物0.5μL、探針0.5μL和無核酸酶純水7.5μL；
擴增程序為：95℃預(yù)變10min；94℃變性15s，60℃延伸1min，循環(huán)40次；50℃2min。
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