[發明專利]一種平衡液以及人凝血因子VIII的制備方法和人凝血因子VIII制品

在審

• 申請號: 201711468790.6
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN108059668A
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發明（設計）人: 馬小偉;潘若文;梁雪爽;張學成;趙東升;王明華
• 申請（專利權）人: 華蘭生物工程股份有限公司;華蘭生物工程重慶有限公司;華蘭生物工程技術（北京）有限公司
• 主分類號: C07K14/755
• 分類號: C07K14/755;C07K1/16;A61K38/37;A61P7/04
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 肖麗

本發明公開了一種平衡液以及人凝血因子VIII的制備方法和人凝血因子VIII制品，涉及血液制品領域。本發明公開的平衡液，其含有氨丁三醇16?24mmol/L、氯化鈉80?120mmol/L、甘氨酸100?140mmol/L以及氯化鈣35?45μmol/L，pH 6.80?7.20。采用該平衡液平衡層析柱使得層析柱上的凝膠介質與上樣樣品的條件一致，避免條件不一致對樣品產生影響，有利于提高人凝血因子VIII的回收率和終產品的比活。

技術領域

本發明涉及血液制品領域，具體而言，涉及一種平衡液以及人凝血因子VIII的制備方法和人凝血因子VIII制品。

背景技術

人凝血因子VIII(Human Cogulation Factor VIII，簡稱AHF)，對缺乏人凝血因子VIII所致的凝血機能障礙具有糾正作用，為甲型血友病患者的終身用藥和急診病患的搶救用藥。在全球近40萬甲型血友病患者中，我國的患者約有6～10萬人，然而接受治療的只有8000人左右，從提高甲型血友病患者的治療率和保障急診用藥計，國內人凝血因子VIII的缺口為現有產量的約20倍。目前國內僅有少數幾家具有AHF的生產批文，供應嚴重緊缺，無法滿足患者基本用藥需求。現有AHF制備主要利用聚乙二醇沉淀、氫氧化鋁吸附等方法進行制備，存在比活性低、收率低等缺點，面對國內AHF市場供應不足的現狀，開發一種收率高、比活高的AHF制備方法，具有積極意義。

鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種人凝血因子VIII的制備方法，采用該制備方法制備人凝血因子VIII成品可以提高收率和產品的比活。

本發明的另一目的在于提供一種用于在純化人凝血因子VIII過程中使用的平衡液。

本發明的另一目的在于提供一種用于在純化人凝血因子VIII過程中使用的洗滌液。

本發明的另一目的在于提供一種用于在純化人凝血因子VIII過程中使用的洗脫液。

本發明的另一目的在于提供一種用于在純化人凝血因子VIII過程中使用的透析液。

本發明的另一目的在于提供一種人凝血因子VIII制品，該人凝血因子VIII制品的比活高，且富含vWF因子，具有良好的穩定性和耐熱性。

本發明是這樣實現的：

一種人凝血因子VIII的制備方法，其包括：冷沉淀處理步驟；

冷沉淀溶解步驟包括：用氨丁三醇溶液溶解從血漿中分離得到的冷沉淀，得冷沉淀溶解液；

其中，氨丁三醇溶液與冷沉淀的質量比為3-5:1，氨丁三醇溶液濃度為0.015-0.025mol/L。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，制備方法還包括：聚乙二醇沉淀步驟；

聚乙二醇沉淀步驟包括：往冷沉淀溶解液中加入聚乙二醇溶液，得第二混合溶液；

第二混合溶液中的聚乙二醇的終濃度控制為2-5％，第二混合溶液的pH調節至6.3-6.6。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，聚乙二醇溶液含有30-32％的聚乙二醇。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，用醋酸調節第二混合溶液的pH調節至6.3-6.6。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，在聚乙二醇沉淀步驟中，將第二混合溶液攪拌05-1h后，靜置1.5-2h。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，制備方法還包括：S/D 滅活步驟；

S/D滅活步驟包括：取由聚乙二醇沉淀步驟得到的上清液，將上清液與S/D病毒滅活溶液混合，得到第三混合溶液，置于24-26℃條件下，攪拌滅活6小時；