[發明專利]抗體修飾的嵌合抗原受體修飾T細胞及其用途

在審

• 申請號: 201711462801.X
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN109971725A
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發明（設計）人: 錢其軍;金華君;江芏青;何周;游術梅;唐熙;李林芳;王超;崔連振
• 申請（專利權）人: 上海細胞治療研究院;上海細胞治療集團有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/13;C12N15/62;C12N15/63;C07K19/00;C07K16/28;A61K39/395;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 韋東

1.一種T細胞，其特征在于，所述T細胞表達抗體或含有抗體的編碼序列或其表達載體，所述抗體含有任選的信號肽、抗原結合序列和突變型Fc段，其特征在于，所述突變型Fc段為：其對應于SEQ ID NO:25所示的IgG4 Fc段的第17位和第79位的位置上的氨基酸殘基分別被突變為E和Q的突變型Fc段；

優選地，所述突變型Fc段為突變型IgG4 Fc段，其氨基酸序列優選如SEQ ID NO:1第269-497位氨基酸殘基所示，優選其編碼序列如SEQ ID NO:2第805-1491位堿基序列所示；

優選地，所述T細胞的基因組中整合了所述抗體的表達框。

2.如權利要求1所述的T細胞，其特征在于，

所述信號肽為輕鏈信號肽，優選其氨基酸序列如SEQ ID NO:1第1-20位氨基酸序列所示，其編碼序列優選如SEQ ID NO:2第1-60位堿基序列所示；和/或

所述抗原結合序列來自與抗原特異性結合的抗體或其抗原結合片段，如單鏈抗體，或來自腫瘤微環境中起作用的蛋白的配體或其與該蛋白結合的片段；優選地，所述抗體是激活性抗體或抑制性抗體；優選地，所述激活性抗體選自針對如下抗原的抗體：CD28、CD137、CD134、CD40、CD40L、ICOS、HVEM、CD2、CD27、CD30、GITR、LIGHT、DR3、SLAM、CD226、CD80和CD86；優選地，所述抑制性抗體選自針對以下抗原的抗體：PD-1、CTLA4、PDL1、PDL2、PDL3、TIM3、LAG3、CD47、BTLA、TIGIT、CD160、LAIR1、B7-H1、B7-1、VSIR和CD244；優選地，所述配體為CD47的配體。

3.如權利要求2所述的T細胞，其特征在于，

所述激活性抗體是CD40單鏈抗體；優選地，所述CD40單鏈抗體的輕鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID NO:1第21-146位氨基酸殘基所示，和/或所述CD40單鏈抗體的重鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID NO:1第161-268位氨基酸殘基所示；優選地，所述CD40單鏈抗體的氨基酸序列如SEQ ID NO:1第21-268位氨基酸殘基所示；

所述抑制性抗體是PD-1單鏈抗體；優選地，所述PD-1單鏈抗體的輕鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID NO:3第21-131位氨基酸殘基所示，和/或所述PD-1單鏈抗體的重鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID NO:3第147-266位氨基酸殘基所示；優選地，所述PD-1單鏈抗體的氨基酸序列如SEQ ID NO:3第21-266位氨基酸殘基所示；

所述CD47配體的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第21-138位氨基酸殘基所示。

4.如權利要求3所述的T細胞，其特征在于，

所述CD40單鏈抗體的輕鏈可變區的編碼序列如SEQ ID NO:2第60-438位堿基序列所示，和/或其重鏈可變區的編碼序列可如SEQ ID NO:2第481-804位堿基序列所示；優選地，所述CD40單鏈抗體的編碼序列如SEQ ID NO:2第60-804位氨基酸殘基所示；

所述PD-1單鏈抗體的輕鏈可變區的編碼序列可如SEQ ID NO:4第60-393位堿基序列所示，和/或其重鏈可變區的編碼序列如SEQ ID NO:4第439-798位堿基序列所示；優選地，所述PD-1單鏈抗體的的編碼序列如SEQ ID NO:4第60-798位氨基酸殘基所示；

所述CD47配體的編碼序列可如SEQ ID NO:6第60-414位堿基序列所示。