[發明專利]一種circRNA基因在制備診斷慢性粒細胞性白血病試劑中的應用

有效

• 申請號: 201711462635.3
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN107988370B
• 公開（公告）日: 2020-05-26
• 發明（設計）人: 馬道新;紀春巖;韓鳳姣;李巍
• 申請（專利權）人: 山東大學齊魯醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

本發明屬于分子生物學和醫學領域，具體涉及一種circRNA基因在制備診斷慢性粒細胞性白血病中的應用。本發明提供了檢測circDOPEY2表達水平的試劑在制備診斷慢性粒細胞性白血病產品中的用途，其中試劑盒產品檢測簡單、準確、快速，特異性強，對于慢性粒細胞性白血病患者實施有效的早診、早治和個體化防治具有重要意義。

技術領域

本發明屬于分子生物學和醫學領域，具體涉及一種circRNA基因在制備診斷慢性粒細胞性白血病試劑中的應用。

背景技術

慢性粒細胞性白血病(chronic myelogenous leukemia，CML)是一類造血干細胞惡性克隆性疾病?？寺⌒园籽〖毎驗樵鲋呈Э?、分化障礙、凋亡受阻等機制在骨髓和其它造血組織中大量增殖累積，并浸潤其它非造血組織和器官，同時抑制正常造血功能。90％以上的病例均具有CML的標記染色體-ph染色體，其是由于9號染色體長臂上C-ABL原癌基因易位至22號染色體長臂的斷裂點簇集區(BCR)形成BCR-ABL融合基因。因而BCR-ABL1融合基因是經典的CML分子標志物。

酪氨酸激酶抑制劑(tyrosinekinaseinhibitor，TKI)能選擇性抑制BCR/ABL蛋白的酪氨酸激酶活性，可顯著改善CML患者的預后。然而，隨著臨床上的廣泛應用和時間的推移，TKI的耐藥現象日益明顯，復發率逐漸升高嚴重影響了CML的治療效果。治療上，羥基脲、阿糖胞苷等曾被廣泛應用，但是，以上療法均不能取得分子生物學緩解。因而尋找新的CML靶點以便可以盡早診斷，是目前所亟需的。

環狀RNA(CircularRNA,circRNA)是一類廣泛存在于生物體內的單鏈非編碼RNA，最早發現于20世紀70年代的植物類病毒中，隨后陸續在酵母菌線粒體內被發現。在早期的研究中，circRNA被認為形成于外顯子轉錄本的錯誤剪接，作為隨機產物并不具備生物學功能，因而相關報道較為少見。近年來，隨著生物信息學及高通量測序技術的迅速發展，大量circRNA被發現并引起關注。越來越多的證據表明，circRNA并非偶然產生，其豐度高、結構穩定并存在時空表達特異性，很可能在調控生物體基因表達過程中發揮重要作用。

前期本申請人經過深入而廣泛的研究，發現一類特殊的非編碼RNA—環狀RNA(circRNA)在腫瘤和正常組織中表達存在顯著差異。因而申請人通過基因芯片和定量PCR技術，對大量候選circRNA基因進行了測定和分析，首次發現DOPEY2的circRNA(circDOPEY2)和慢性粒細胞性白血病患者臨床診斷密切相關。

發明內容

本發明的目的是提供一種用于診斷慢性粒細胞性白血病產品，可以盡早診斷，以方便患者盡早治療，增加治愈或延長患者生命期限。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

本發明第一個方面，提供了檢測circDOPEY2表達水平的試劑在制備診斷慢性粒細胞性白血病產品中的用途。

本發明第二個方面，提供一種診斷慢性粒細胞性白血病的產品，所述產品包括試劑盒，所述試劑盒包括可以檢測circDOPEY2表達水平的PCR反應試劑。

本發明第三個方面，提供一種非診斷目的的是否存在circDOPEY2基因及其定量檢測方法，步驟如下：

(1)用權利要求1或2所述的引物擴增待檢樣品，得到擴增產物；

(2)對擴增產物進行序列測定，檢測擴增產物中是否存在circDOPEY2；

(3)與內參基因GAPDH相比，利用2^-ΔCt方法，計算circDOPEY2的表達量。

與現有技術相比，本發明的技術方案具有如下有益效果：