[發(fā)明專(zhuān)利]一種固相抗體雙夾心免疫反應(yīng)體系及其試劑盒與應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711462115.2
• 申請(qǐng)日: 2017-12-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108196047A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊曉;于麗;李秀清
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣東希格生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/543
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/543
• 代理公司: 廣州粵高專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 任重

1.一種固相抗體雙夾心免疫反應(yīng)體系，其特征在于，所述免疫反應(yīng)體系采用全固相待反應(yīng)組分，通過(guò)將檢測(cè)抗體固相化，預(yù)置到反應(yīng)孔或反應(yīng)管中，待樣本加入反應(yīng)孔或反應(yīng)管后，孵育后即可完成免疫反應(yīng)；

所述檢測(cè)抗體固相化的方法為：將檢測(cè)抗體預(yù)制微球或?qū)z測(cè)抗體凍干。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫反應(yīng)體系，其特征在于，所述將檢測(cè)抗體預(yù)制微球或?qū)z測(cè)抗體凍干的方法包括以下步驟：

S01. 將檢測(cè)抗體與保護(hù)劑混合得混合物A；

S02. 將混合物A于-5～-196℃冷凍；

S03. 將步驟S02中冷凍的混合物A保持溫度在0℃以下，抽真空；

S04. 將步驟S03中抽真空后的混合物A干燥0.5～48小時(shí)，得固相檢測(cè)抗體。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫反應(yīng)體系，其特征在于，所述檢測(cè)抗體固相化的方法還包括將檢測(cè)抗體表面包裹薄膜。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的免疫反應(yīng)體系，其特征在于，所述將檢測(cè)抗體表面包裹薄膜的方法為：對(duì)凍干后的或微球化的抗體表面進(jìn)行噴金處理。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的免疫反應(yīng)體系，其特征在于，所述噴金處理的條件為電流10～50mA，時(shí)間20～300秒；所述噴金處理采用的設(shè)備為離子濺射鍍膜儀。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的免疫反應(yīng)體系，其特征在于，步驟S01所述保護(hù)劑的配方為：

干酪素 0.5%～10%；

牛血清白蛋白 0.5%～10%；

蔗糖 0.5%～10%；

海藻糖 0.5%～10%；

聚乙二醇（PEG） 0.5%～10%；

聚乙烯吡咯烷酮（PVP） 0.5%～10%。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫反應(yīng)體系，其特征在于，所述檢測(cè)抗體為酶聯(lián)抗體、熒光標(biāo)記抗體、吖啶脂標(biāo)記抗體或生物素標(biāo)記抗體。

8.一種固相抗體雙夾心免疫反應(yīng)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒采用權(quán)利要求1至7任一所述固相抗體雙夾心免疫反應(yīng)體系，所述試劑盒包括：反應(yīng)孔或反應(yīng)管、反應(yīng)底物、抗原標(biāo)準(zhǔn)品、洗滌液、稀釋液。

9.權(quán)利要求8所述試劑盒的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

S11. 制備固相化的檢測(cè)抗體；

S12. 將含有捕獲抗體的緩沖液加入反應(yīng)裝置中，使捕獲抗體吸附于反應(yīng)孔或反應(yīng)管中；

S13. 將步驟S11制備的檢測(cè)抗體預(yù)置到反應(yīng)孔或反應(yīng)管中；

S14. 配制抗原標(biāo)準(zhǔn)品、洗滌液、稀釋液。

10.權(quán)利要求8所述試劑盒在免疫檢測(cè)方面的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用的方法為包括以下步驟：

S21. 在反應(yīng)孔或反應(yīng)管中加入待測(cè)樣品，孵育；

S22. 棄去多余樣品，洗滌，加入反應(yīng)底物；

S23. 觀察或檢測(cè)反應(yīng)結(jié)果。