[發明專利]一種基于脂聯素基因ADP鑒定鴨繁殖性狀的分子標記及其應用

有效

• 申請號: 201711459759.6
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN108085398B
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 陳興勇;耿照玉;廖望;黃永強;舒琴
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學;安慶永強農業科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 合肥中谷知識產權代理事務所(普通合伙) 34146
• 代理人: 洪玲

本發明公開了一種基于脂聯素基因ADP鑒定鴨繁殖性狀的分子標記及其應用，所述脂聯素基因ADP的CDS序列如SEQ ID NO.1所示，所述分子標記為如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的第430位的堿基由G突變為A。與現有技術相比，本發明利用調節脂肪代謝的脂聯素基因多態產生的多種基因型與產蛋和種鴨繁殖的相關性，通過對脂聯素基因的分子標記與繁殖性狀的關聯，提供了一種間接選擇家禽繁殖性狀的方法，建立了鴨繁殖性狀早期選擇的育種方法。由于該脂聯素基因ADP同時表達于母禽卵巢和輸卵管，以及公禽睪丸，因此還可以對公禽進行選擇，填補了常規鴨繁殖性狀選擇過程中無法對公禽進行選擇的空白。

技術領域

本發明涉及的是分子標記的技術領域，尤其涉及的是一種基于脂聯素基因ADP鑒定鴨繁殖性狀的分子標記及其應用。

背景技術

繁殖性狀是畜禽生產中重要的經濟性狀之一，并受脂肪沉積的影響。母禽在育成期和產蛋期體脂沉積過多，卵巢和輸卵管受大量脂肪包圍和壓迫，影響卵泡發育和排卵，導致產蛋下降。而分泌蛋殼的子宮腺周圍脂肪沉積增加則影響蛋殼的形成，降低禽蛋品質。家禽脂肪沉積的遺傳力為0.3-0.85，呈中高度遺傳。然而，常規選擇的遺傳進展緩慢，且無法對公禽進行選擇。

脂聯素是由脂肪細胞特異分泌的內源性細胞因子，對家禽繁殖性狀發揮重要的調控作用，是調節卵泡發育和卵母細胞成熟過程中能量需求的關鍵信號。脂聯素基因同時表達于母禽卵巢和輸卵管，以及公禽睪丸。中樞表達的脂聯素通過加強葡萄糖代謝促進能量消耗以降低體脂，起到促進排卵、提高繁殖力的作用。

地方鴨種繁殖性狀因就巢性而受到嚴重影響，單純常規選擇的遺傳改良效率不高，利用功能基因標記進行分子標記輔助選育可以從遺傳上根本改良選擇性狀，從而加速遺傳進展。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種基于脂聯素基因ADP鑒定鴨繁殖性狀的分子標記及其應用，以解決常規鴨繁殖性狀遺傳選擇進展緩慢，且無法對公禽進行選擇的技術問題。

本發明是通過以下技術方案實現的：

本發明提供了一種基于脂聯素基因ADP鑒定鴨繁殖性狀的分子標記，所述脂聯素基因ADP的CDS序列如SEQ ID NO.1所示，或為與SEQ ID NO.1所示序列互補的核苷酸序列，所述分子標記為如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的第430位的堿基由G突變為A，或為如SEQ ID NO.1所示序列互補的核苷酸序列的第430位的堿基由C突變為T，該突變導致該位點編碼的氨基酸由丙氨酸突變為蘇氨酸。

本發明還提供了一種上述分子標記在鑒定鴨繁殖性狀中的應用，所述鴨繁殖性狀主要指鴨的產蛋數和孵化率。

本發明還提供了一種利用上述分子標記鑒定鴨繁殖性狀的方法，包括以下步驟：

(1)提取鴨翅靜脈血液總DNA；

(2)以所述分子標記所在位點上下游的脂聯素基因ADP的DNA序列為模板，設計特異性擴增引物，再以步驟(1)的鴨翅靜脈血液總DNA為PCR擴增模板，進行PCR擴增，獲得PCR擴增產物；

(3)采用HgaⅠ酶切PCR擴增產物，獲得酶切產物，由于HgaⅠ酶切識別位點為GACGC/CTGCG，因此，當該分子標記位點由G突變為A時，不能被HgaⅠ酶識別，電泳檢測酶切產物，實現對鴨繁殖性狀的遺傳鑒定，具體為：

I、包含1條條帶，則為AA純合型，繁殖性狀最優；

Ⅱ、包含2條條帶，則為GG純合型，繁殖性狀最差；

Ⅲ、包含3條條帶，則為AG雜合型，繁殖性狀適中。

進一步地，所述分子標記所在位點的上游擴增產物的長度與下游擴增產物的長度均大于100bp，且所述分子標記所在位點的上游擴增產物與下游擴增產物的長度差大于100bp，以利于電泳檢測和條帶區分。