[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的組合物及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711451313.9
• 申請(qǐng)日: 2017-12-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108373992A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王健;熊華強(qiáng);宋彩霞;胡小東
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 重慶斯德姆生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/0735
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/0735
• 代理公司: 重慶百潤(rùn)洪知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 50219
• 代理人: 劉立春

本發(fā)明提供一種用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的組合物，其能確保胚胎干細(xì)胞長(zhǎng)期處于未分化狀態(tài)并具有無(wú)限增殖的能力。其包括白血病抑制因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、Rho激酶抑制劑Y27632、MEK抑制劑和骨形態(tài)發(fā)生蛋白抑制劑Noggin。本發(fā)明還提供了包含該組合物的細(xì)胞培養(yǎng)液及其應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細(xì)胞學(xué)領(lǐng)域，具體地，涉及一種用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的組合物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

人類(lèi)胚胎干細(xì)胞的成功分離培養(yǎng)建系是當(dāng)今生命科學(xué)的重要進(jìn)展，它是從人類(lèi)早期植入前胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中分離而來(lái)的、能在體外適當(dāng)條件下保持不分化并不斷增殖的一種干細(xì)胞。理論上，它具有分化成機(jī)體所有細(xì)胞組織的潛能，被稱(chēng)為種子細(xì)胞。人們可以利用不同的培養(yǎng)條件將胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化產(chǎn)生大量不同類(lèi)型的細(xì)胞來(lái)作為細(xì)胞移植、組織替代甚至器官克隆的細(xì)胞供體，為將來(lái)治療人類(lèi)諸多的難治性疾病提供無(wú)限的細(xì)胞來(lái)源。因此在將來(lái)的醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用中前景廣闊，成為21世紀(jì)生命科學(xué)中又一研究熱點(diǎn)。

此外，人胚胎細(xì)胞還有諸多其他用途，比如，其作為基因治療的載體，通過(guò)同源重組方式進(jìn)行基因剔除或轉(zhuǎn)基因?qū)⑿揎椈驅(qū)氲礁杉?xì)胞中，可達(dá)到基因治療的目的:它可提供任何組織類(lèi)型的正常人類(lèi)細(xì)胞，為開(kāi)發(fā)新藥提供大量標(biāo)本，而且可用于篩選藥物、鑒定新藥作用的靶基因位點(diǎn)、篩選用于組織再生基因治療的基因。哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞則是生物醫(yī)學(xué)研究中的重要工具和模型。高效的胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)將促進(jìn)基于干細(xì)胞的再生生物醫(yī)學(xué)的研究和臨床治療。

胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)需要注意以下兩點(diǎn)：一、確保胚胎干細(xì)胞處于未分化狀態(tài):二、確保胚胎干細(xì)胞具有無(wú)限增殖的能力。然而，現(xiàn)有的培養(yǎng)基還不能達(dá)到理想的效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的組合物，其能確保胚胎干細(xì)胞長(zhǎng)期處于未分化狀態(tài)并具有無(wú)限增殖的能力。

本發(fā)明另一個(gè)要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種包含該組合物并能夠適用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)液。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的一種用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的組合物，包括白血病抑制因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、Rho激酶抑制劑Y27632、MEK抑制劑和骨形態(tài)發(fā)生蛋白抑制劑Noggin，所述組合物中各成份的含量如下：

進(jìn)一步地，所述基礎(chǔ)培養(yǎng)液包括

其中非必需氨基酸由等濃度的丙氨酸、精氨酸、天門(mén)冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸和酪氨酸組成。

更進(jìn)一步地，所述組合物中各成份的含量如下：

更進(jìn)一步地，所述組合物中各成份的含量如下：

更進(jìn)一步地，所述組合物中各成份的含量如下：

更進(jìn)一步地，所述組合物中各成份的含量如下：

更進(jìn)一步地，所述組合物中各成份的含量如下：

更進(jìn)一步地，所述組合物中各成份的含量如下：

更進(jìn)一步地，所述組合物中各成份的含量如下：

更進(jìn)一步地，所述組合物中各成份的含量如下：