[發明專利]組織中與結直腸癌轉移相關的miRNA標志物及其應用

有效

• 申請號: 201711441924.5
• 申請日: 2017-12-27
• 公開（公告）號: CN108004323B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 張力圖;劉海洲;利基林;寧淑芳;韋文娥;陳伊;譚曉玉;謝雨萱
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區腫瘤防治研究所
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理有限公司 11369
• 代理人: 靳浩

本發明公開了組織中與結直腸癌轉移相關的miRNA標志物及其應用，屬于生物技術和醫學技術領域，其中，組織中與結直腸癌轉移相關的miRNA標志物為miR?96、miR?99b、miR?155、let?7a和let?7b中的任意一種或幾種。本發明篩選出的組織中與結直腸癌轉移相關的miRNA對預測結直腸癌轉移的特異性和靈敏度均顯著高于目前臨床上使用的腫瘤標志物CEA，大大提高了診斷的準確性。

技術領域

本發明涉及生物技術和醫學技術領域。更具體地說，本發明涉及組織中與結直腸癌轉移相關的miRNA標志物及其應用。

背景技術

結直腸癌(Colorectal cancer，CRC)是常見的消化道癌癥之一，并且是全世界癌癥相關死亡的第三主要原因。結直腸癌肝轉移的發生是一個多因素和多步驟的過程。約20-25％的CRC患者最初被診斷為肝轉移，并且高達40-50％的患者在原發性腫瘤切除術后發生肝轉移。大多數結直腸肝轉移患者不適合根治性手術切除，五年存活率≤10％。

結直腸癌患者肝轉移的發生除了與原癌基因及抑癌基因表達情況異常或丟失有關，也與“表觀遺傳學”，如乙酰化、甲基化和非編碼RNA調控緊密相關。有研究證實，在結直腸癌的肝轉移發生進展過程中，miRNA廣泛參與其調控，有學者稱這類miRNA為“metastamiR”。

微小RNA(miRNA)是類長度為18-25個核苷酸的內源非編碼RNA，其通過與信使RNA的3'非翻譯區(UTR)堿基結合，在轉錄后水平調節靶基因的表達，從而使翻譯受到抑制或信使RNA裂解。高達20-30％的基因的表達由miRNA來調節。通過調節生理和病理過程，差異表達的miRNA在腫瘤的發生、進展、轉移和復發中起著重要作用。2003年，Michael首次提出結直腸癌中存在差異表達的miRNA。隨后，關于結直腸癌的miRNA的研究越來越多。某研究表明，存在miRNA在結直腸腫瘤發生和發展的不同階段差異表達(高級別腺瘤-腫瘤早期-腫瘤晚期)。miR-543通過靶向HMGA2，KRAS和MTA1來抑制結直腸癌細胞系的增殖和轉移，并且有望成為轉移性結直腸癌的新型診斷和預后生物標志物。與健康受試者相比，CRC患者中較高水平的miR-211提示較差的預后。大量的研究表明，循環miRNA可作為潛在的診斷和預后標志物。近年，雖然miRNA已經得到大量的研究和驗證，但是結直腸癌肝轉移相關miRNA潛在的作用和功能很大程度上仍然未知，需要進一步發現和驗證。

結直腸癌肝轉移的病人，以手術為主，輔以放化療、介入治療及靶向治療的綜合治療使患者生存時間得到了顯著提高。但隨著治療策略的不斷提升，新的問題也不斷涌現。根治性手術治療可將結直腸癌肝轉移的5年生存率提高至50％，對于選擇性高的結直腸癌肝轉移患者，甚至可以達到60％；但對于可切除的結直腸癌肝轉移病人，術后仍有將近50％的患者會出現腫瘤復發。

傳統的篩檢方法，如腹腔鏡，細針抽吸細胞學和影像學方法，如增強計算機斷層掃描(CT)、磁共振成像(MRI)為侵入性的、并發癥高或典型指征不足，因此難以成為結直腸癌肝轉移患者早期篩選的有效方法。因此，迫切需要尋找早期診斷和預后評估的非侵入性精準的生物標志物，用于結直腸癌患者的診斷和治療。

發明內容

本發明的目的是提供組織中與結直腸癌轉移相關的miRNA標志物及其應用，通過生物信息學方法挖掘與結直腸癌肝轉移有關的miRNA標志物，進一步釆用結直腸癌患者的石蠟包埋組織標本進行驗證，同時分析差異表達miRNA與結直腸癌診斷的關系。

為了實現根據本發明的這些目的和其它優點，提供了與結直腸癌轉移相關的miRNA標志物，該標志物在組織中為miR-96、miR-99b、miR-155、let-7a和let-7b中的任意一種或幾種。

優選的是，所述的與結直腸癌轉移相關的miRNA標志物中，該標志物在組織中為miR-99b、miR-155和let-7a中的任意一種或幾種。