[發(fā)明專利]用于從FFPE組織切片中提取樣品的脫蠟裝置及脫蠟方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711437603.8
• 申請日: 2017-12-26
• 公開（公告）號: CN108004118A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王東方;王泰華
• 申請（專利權(quán)）人: 東莞賽爾生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12N15/10
• 代理公司: 濟(jì)南誠智商標(biāo)專利事務(wù)所有限公司 37105
• 代理人: 楊先凱

本申請公開了一種用于從FFPE組織切片中提取樣品的脫蠟裝置，包括底座、組織切片托盤、脫蠟液供液組件、振動組件、廢液回收組件以及吹氣干燥組件；能夠?qū)Ψ胖糜诮M織切片托盤中的FFPE組織切片依次進(jìn)行提供脫蠟液浸沒、振動脫蠟、回收脫蠟廢液以及吹氣干燥處理；本申請通過整合人工FFPE組織切片的核酸提取前處理的步驟，避免了人工處理方法的缺點(diǎn)，獲得了更好的工作效率，降低了工作強(qiáng)度和達(dá)到了更低的成本，避免了脫蠟期間的組織交叉污染，且該脫蠟裝置結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，快速，價格低。本發(fā)明還提供了一種用于從FFPE組織切片中提取樣品的脫蠟方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種用于從FFPE組織切片中提取樣品的脫蠟裝置及脫蠟方法。

背景技術(shù)

在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，遺傳醫(yī)學(xué)，個性化醫(yī)學(xué)和基因靶向治療已成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中有希望的新突破點(diǎn)。為此，需要將來自靶組織(FFPE組織切片中由專業(yè)人員確定和標(biāo)記的需要進(jìn)一步檢測的特定區(qū)域)的核酸(DNA和RNA)分離出來，以用于臨床醫(yī)學(xué)或生物科學(xué)研究中的基因分析。此處的FFPE組織切片意指福爾馬林固定石蠟包埋組織切片。

一般公認(rèn)，從新鮮組織中提取的核酸在核酸質(zhì)量方面更適合基因分析；然而，使用新鮮組織的主要限制是時間和可獲得性，特別是從患者收集內(nèi)臟器官組織。因此，在多數(shù)情況下可利用的組織以穿刺活檢或手術(shù)中獲得的經(jīng)FFPE處理的組織切片為主。FFPE組織具有在室溫下儲存幾十年仍可抽提其核酸(DNA和RNA)并且可用于基因檢測的優(yōu)點(diǎn)。已有許多報道證實了從FFPE組織中提取DNA和RNA的滿意的可用性；提取的核酸常用于PCR、定量PCR、單核苷酸多態(tài)性(SNP)分析、SANGER測序和新一代基因測序。在可預(yù)見的未來，F(xiàn)FPE組織仍是臨床實踐中保存組織樣品的首選。

FFPE組織中的核酸的提取相對于用新鮮組織更困難，是一個多步驟過程；包括FFPE組織脫蠟、干燥、刮取和核酸的抽提，每一步對于所提取的核酸的質(zhì)量和產(chǎn)量都是重要的。目前市場上已有許多商業(yè)的FFPE組織的核酸提取試劑盒供應(yīng)，然而對于固定于病理載玻片上的靶組織和面積較小的組織，特別是細(xì)小的穿刺活檢(其尺寸可以小到幾個mm2)，卻沒有高效的方法和設(shè)備。人工的FFPE組織切片的核酸提取要有多個人工的步驟：首先要人工脫蠟多次，要在脫蠟罐中翻轉(zhuǎn)，取出組織切片后在空氣中自然干燥，在FFPE組織切片上加上核酸提取溶液，使用無菌手術(shù)刀片刮取組織并通過移液管收集標(biāo)本。此人工的方法是目前生物醫(yī)學(xué)實驗室中的最常規(guī)的方法。很顯然的，這些人工操作步驟耗費(fèi)時間，手工強(qiáng)度大(手指和手腕的頻繁運(yùn)動)，特別是當(dāng)有中等或大數(shù)量的樣本需要及時處理時困難會更大。此外，當(dāng)將多個組織切片放置在用于脫蠟罐中時，存在組織交叉污染的風(fēng)險。激光微分離技術(shù)是另一種用于在載玻片上分離FFPE組織的方法，激光微分離的優(yōu)點(diǎn)是能夠精確地分離微小的組織，但與常規(guī)手工法相比，應(yīng)用成本太高，而且更耗時，每一張切片都要20分鐘左右，這顯然不能滿足現(xiàn)實的大量樣品處理的需要。此外還有幾種市售的“自動的FFPE組織核酸抽提系統(tǒng)”，然而，F(xiàn)FPE組織樣本的分離并不是自動化的一部分，要從組織蠟塊上切取5-10片組織，用的組織量大，不適合穿刺活檢的FFPE組織，而且不能在組織切片上選擇性地分離靶組織區(qū)。因此上述人工的FFPE組織核酸提取方法仍然是生物醫(yī)學(xué)實驗室中最常用的技術(shù)。

因此，如何避免人工的FFPE組織切片核酸提取方法的缺點(diǎn)并且保留其優(yōu)點(diǎn)，獲得更好的工作效率，降低工作強(qiáng)度和達(dá)到更低的成本是目前本領(lǐng)域技術(shù)人員亟需解決的技術(shù)問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種用于從FFPE組織切片中提取樣品的脫蠟裝置，該脫蠟裝置用于FFPE組織切片的脫蠟、排除脫蠟廢液以及干燥FFPE組織切片上殘留的脫蠟液，避免人工的FFPE組織切片核酸提取方法的缺點(diǎn)并且保留其優(yōu)點(diǎn)，獲得更好的工作效率，降低工作強(qiáng)度和達(dá)到更低的成本。本發(fā)明的另外一個目的是提供一種用于從FFPE組織切片中提取樣品的脫蠟方法。

為解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：