[發明專利]DC的負調控因子靶向沉默與DC動員擴增的腫瘤聯合療法

在審

• 申請號: 201711434484.0
• 申請日: 2017-12-26
• 公開（公告）號: CN108126185A
• 公開（公告）日: 2018-06-08
• 發明（設計）人: 張瑜娟;閔衛平;付佳敏;彭珊珊
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: A61K38/18
• 分類號: A61K38/18;A61K31/7105;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 趙艾亮

本發明為DC的負調控因子靶向沉默與DC動員擴增的腫瘤聯合療法，提供了一種腫瘤的新型療法，該方法聯合DC體內的動員擴增和DC的免疫負調控因子表達的miRNA靶向沉默對腫瘤進行治療；DC在體內的經動員擴增后，由DC納米遞送系統靶向導入miRNA于DC內，以RNA干擾技術控制DC中的免疫負調控因子的表達，可進一步強化防疫系統對腫瘤的放應能力；該療法可作為手術、放療或化療在內的其他臨床治療手段的輔助治療方法，同時，可以用于治療實體瘤或非實體瘤；該療法效果顯著，副作用小，能有效抑制腫瘤細胞生長甚至殺死腫瘤細胞，為臨床腫瘤的免疫治療研究提供一條新途徑。

技術領域

本發明涉及生物醫藥的技術領域，尤其涉及一種聯合靶向沉默DC的負調控因子的表達與DC的體內動員擴增的腫瘤新型療法。

背景技術

腫瘤一直是醫學界亟待攻克的難題，腫瘤的發生涉及到多種分子及基因的改變，包括原癌基因突變、擴增或抑癌基因丟失、失活等因素。

腫瘤的免疫治療是激發和增強機體以達到控制和殺滅腫瘤細胞的目的的概念，其常被作為一種輔助療法，與手術、化療或放療等常規療法聯合應用。其中樹突狀細胞(Dendritic cell，DC)是目前所知惟一能激活初始性T細胞的專職抗原提呈細胞(Antigenpresenting cells，APC)，具有激活CD8⁺CTL和CD4⁺T輔助細胞的強大能力，其在免疫應答中居于中心地位，對機體克服腫瘤的免疫逃逸、增強機體對腫瘤的免疫清除等具有十分重要的作用。DC作為腫瘤免疫應答的中心環節，已成為當今腫瘤生物治療領域備受關注的熱點之一。在腫瘤患者體內，由于受腫瘤免疫抑制作用的影響，DC處于失能狀態，難以激發機體有效的抗腫瘤免疫反應。為此，眾多學者通過各種方法培養、激活和致敏DC，研制DC疫苗，使其在誘導特異性免疫應答時發揮重要作用，以達到控制腫瘤的目的。腫瘤疫苗旨在誘導細胞毒性T細胞(CTL)針對腫瘤抗原反應，以啟動宿主抗瘤免疫應答。CTL的活化需要APC表面的主要組織相容性復合體(MHC)分子對抗原進行遞呈。DC是最有效的APC，用它作腫瘤疫苗接種可誘導CTL反應并使一些病灶的腫瘤消退。

目前，以DC為基礎的免疫治療策略主要可分為2種：(1)體外分離并培養DC后，用腫瘤抗原修飾加工合成DC疫苗，然后重新回輸給患者；(2)應用FMS樣酪氨酸激酶3配體(FMS-like tyrosine kinase-3ligand，Flt3-L)在體內動員DC，刺激DC的擴增和成熟進行治療，避免了體外提取DC的過程。Flt3-L是一種與造血調控有關的早期造血生長因子，可促進DC分化，具有在體內大量擴增小鼠及人類外周血和淋巴組織中DC的功能，并可刺激T細胞、NK細胞增殖，是一種重要的免疫網絡因子。已被應用于腫瘤患者，在體內動員DC達到治療目的，Flt3-L處理小鼠后，可明顯增加體內DC的數量，促進DC的功能；且在乳腺腫瘤、前列腺腫瘤、顱內腫瘤等腫瘤的基礎或臨床研究中，顯示了延緩腫瘤生長、擴散及誘導腫瘤特異性免疫應答作用。

多年來DC疫苗的應用研究取得了一定效果，迄今，已有超過100項有關DC疫苗應用于Ⅰ、Ⅱ期臨床實驗的研究報導。然而，近年來已有不少學者發現接受自體DC疫苗治療的患者，病情有所加重，生存期縮短，出現DC功能抑制，引起機體對腫瘤抗原的免疫耐受并促進腫瘤生長，表明DC疫苗的臨床應用還存在許多亟待解決的問題。研究表明應用生物免疫治療激發或增強特異性抗腫瘤免疫應答，腫瘤細胞仍能夠逃脫宿主的免疫攻擊，即腫瘤免疫逃逸。