[發明專利]5-甲基嗎啉-3-氨基-2-唑烷基酮抗原、抗體及制備與應用

有效

• 申請號: 201711431980.0
• 申請日: 2017-12-26
• 公開（公告）號: CN108129412B
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 沈玉棟;何凡;鄒婷婷;徐振林;楊金易;王弘;韋曉群;孫遠明;雷紅濤
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C07D263/26
• 分類號: C07D263/26;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K14/415;C12N9/26;C07K16/44;G01N33/535
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 林麗明

本發明公開了一種5?甲基嗎啉?3?氨基?2?唑烷基酮抗原、抗體及其制備方法與應用。對5?甲基嗎啉?3?氨基?2?唑烷基酮分子結構進行改造，包括引入羰基結構使半抗原手臂結構自由旋轉度下降，使半抗原呈現構象限定性以及增加結構復雜性等，使得分子的特征結構更好的被免疫動物所識別，大大增加制備抗體的成功幾率。并以此基礎制備了5?甲基嗎啉?3?氨基?2?唑烷基酮人工抗原和抗體，效價高、檢測效率高；克服了傳統儀器法存在周期長、專業性強、成本高，不適宜現場大批量快速檢測等缺點問題。本發明的抗原抗體合成過程簡單、成本低。

技術領域

本發明屬于藥物檢測技術領域。更具體地，涉及一種5-甲基嗎啉-3-氨基-2- 唑烷基酮抗原、抗體及其制備方法與應用。

背景技術

呋喃它酮(furaltadone)，屬于硝基呋喃類藥物，是一類人工合成的廣譜抗菌藥物，在動物體內的代謝物是5-甲基嗎啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)。因為呋喃它酮能夠干擾細菌體內的氧化還原酶系統，破壞細菌的糖代謝，使整個代謝系統紊亂，從而很好的起到殺菌作用。其作為一種藥效顯著的廣譜抗菌藥物，曾廣泛應用于畜禽及水產養殖業，以治療由大腸桿菌或沙門氏菌所引起的腸炎、疥瘡、赤鰭病、潰瘍病等或者作為促進水產動物生長的添加劑。呋喃它酮原藥經動物服用后，在體內的代謝速度很快，一般數個小時就能轉化成代謝物AMOZ，AMOZ能與動物體內蛋白質結合成穩定的殘留物，在體內的代謝時間很長，當動物體內的這類藥物殘留量達到一定量時，會出現一系列的毒性癥狀，主要表現出腹瀉、胃腸出血、周圍神經炎、癱瘓、驚厥等反應，嚴重的造成動物死亡。另外，這類殘留在動物體內的呋喃它酮代謝物通過我們普通的食品加工過程較難消除，如長時間的蒸煮、微波加熱、燒烤等方式，都無法使其降解。當我們食用含有這類藥物殘留的食物后，殘留物在人體酸性的胃液環境中釋放，被人體吸收，進一步對人體的健康產生危害，如果長時間的蓄積則會誘導產生致畸、致癌和致突變等病變。最后，呋喃它酮原藥本身也是一種致癌性較強的藥物，能引起人體 DNA一定程度的損傷以及真核細胞的誘變。

由于呋喃它酮及其代謝物的殘留給人體及環境造成的危害之大，全球許多國家對它的使用做了限制。歐盟于1995年規定在動物性食品中禁止使用此類藥物，并不得檢出，在2007年將這類藥物列為違禁藥物。2010年，我國發布了《食品中可能違法添加的非食用物質和易濫用的食品添加劑名單(第四批)》的通知，明確將硝基呋喃類藥物呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因及呋喃西林列入可能違法添加的非食用物質名單。但是由于硝基呋喃類藥物價格便宜且藥效好，目前在畜牧、禽和水產養殖業中還在大范圍的使用。同時也出現了相應的食品安全事件，如 2015年，山東食品藥品監督管理局在抽檢的肉及肉制品中檢出呋喃它酮代謝物。 2017年，國家食藥監局11月9日通報，該局抽檢了鮮活水產品607批次，檢出不合格樣品66批次，其中硝基呋喃代謝物不合格樣品16批次。針對以上情況，對于加強水產品等肉制品中的呋喃它酮類物質的檢測亟不可待。因呋喃它酮在動物體內代謝快，若對其殘留量進行檢測，結果必定不夠準確，而其代謝物因能和動物體內的蛋白形成穩定的結合物，所以檢測其代謝物比檢測原藥更有意義。