[發(fā)明專利]一種異鼠李素的制備方法及其抑制小鼠黑色素瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201711431153.1 | 申請(qǐng)日： | 2017-12-19 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN108084135A | 公開（公告）日： | 2018-05-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 斯越秀;張麗麗;尹尚軍 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 浙江萬里學(xué)院 |
| 主分類號(hào)： | C07D311/30 | 分類號(hào)： | C07D311/30;C07D311/40;A61K31/352;A61P35/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 315100 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 異鼠李素 制備 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 細(xì)胞凋亡 增殖 提取黃酮類化合物 細(xì)胞周期分析 應(yīng)用 抗腫瘤藥物 沙棘果渣 細(xì)胞毒性 藥物作用 工作液 瘤細(xì)胞 增殖的 抗性 配制 誘導(dǎo) 開發(fā) 細(xì)胞 分析 | ||
1.一種異鼠李素的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟a、從沙棘果渣中提取黃酮類化合物；
所述步驟a包括：
脫脂，取干燥的沙棘果渣，以1∶8的料液比加入石油醚，浸泡1h后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于水浴70℃加熱回流1.5h，過濾，保留濾渣，將濾渣再以1∶6的料液比加入石油醚后加熱回流1h，過濾，回收濾渣，使石油醚充分揮發(fā)至干，待提取用；
提取：稱取脫脂后的沙棘果渣，采用超聲波提取法提取，提取液過濾，濃縮后，得到總黃酮濃縮液；
單因素分析及正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)；
步驟b、異鼠李素的純化、鑒定；
所述步驟b包括：根據(jù)所述步驟a的提取步驟得到黃酮粗品，再將黃酮粗品濃縮液裝入分液漏斗中，加入等體積的正丁醇充分萃取；去掉正丁醇相，保留水相，再用乙酸乙酯反復(fù)萃取，合并乙酸乙酯相；將乙酸乙酯相用聚酰胺柱分離，依次用10％乙醇，30％乙醇，50％乙醇，75％乙醇和90％乙醇洗脫收集，將柱分離后的各組分溶液用高效液相色譜儀檢測(cè)，得到純化并鑒定后的異鼠李素。
2.一種異鼠李素抑制小鼠黑色素瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的應(yīng)用，其特征在于，包括：異鼠李素工作液的配制；瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與藥物作用；細(xì)胞MTT檢測(cè)；細(xì)胞周期分析；細(xì)胞凋亡分析。
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