[發明專利]一株特基拉芽孢桿菌CAS-MEI-2-33及其應用

有效

• 申請號: 201711419792.6
• 申請日: 2017-12-25
• 公開（公告）號: CN109957522B
• 公開（公告）日: 2019-10-29
• 發明（設計）人: 張海波;咸漠;張鴿;王帆
• 申請（專利權）人: 中國科學院青島生物能源與過程研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/18;C12N9/26;C12N9/88;C12R1/07
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

本發明公開了一株特基拉芽孢桿菌CAS?MEI?2?33及其應用，屬于煙草廢棄物回收再利用技術領域。該菌株于2017年10月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC NO.14826。該菌株具有生長迅速、能降解果膠的性能，且該菌株可以以煙草廢棄物為原料發酵生產果膠酶，獲得果膠酶的粗酶液，該菌株能夠使得煙草廢棄物變廢為寶，既在一定程度上提高了煙草廢棄物的利用問題，又擴大了堿性果膠酶的來源。本發明菌株適用于發酵生產果膠酶。

技術領域

本發明涉及一株特基拉芽孢桿菌CAS-MEI-2-33及其應用，屬于煙草廢棄物回收再利用技術領域。

背景技術

我國是煙草生產大國，每年除了生產大量煙葉外，伴隨產生大量的煙草廢棄物，包括煙梗、煙花、煙根、煙杈、腋芽、打頂除掉的頂葉以及腳葉等，通常被大量丟棄在田間或儲存霉爛，不僅是資源浪費，對環境也是一種破壞。目前雖對煙草廢棄物的利用開發逐步展開，如利用其生產有機肥、制備活性炭、栽培平菇、制備工業乙醇以及生產農藥等，但由于各種方法的局限性，但對其開發利用程度還遠遠不夠。對煙草廢棄物的開發利用一直是適應環境友好型社會要求不斷努力的方向。

研究發現，煙梗中果膠含量較高，約占7％-11％左右，目前利用煙梗生產果膠酶的菌株主要是真菌，真菌發酵周期較長，且利用真菌發酵生產的果膠酶一般偏酸性；而細菌因其繁殖快，發酵周期短，越來越被人們重視。細菌發酵所產果膠酶一般偏堿性，堿性果膠酶不僅在咖啡和茶葉發酵中、棉纖維精練和麻脫膠中發揮重要作用，而且在造紙污水處理中也有重要應用，目前，利用細菌發酵煙梗生產果膠酶還沒有研究報道，該研究不僅能在一定程度上提高對煙草廢棄物的利用，而且還能擴大市場所需堿性果膠酶的來源，具有重要意義。

發明內容

為擴大現有堿性果膠酶來源、提高煙草廢棄物利用率的問題，本發明提供了一株特基拉芽孢桿菌CAS-MEI-2-33及其應用，該菌株能夠以煙草廢棄物為原料發酵生產果膠酶，在一定程度上解決了煙草廢棄物的回收利用，而且擴大了堿性果膠酶來源，采用的技術方案如下：

本發明特基拉芽孢桿菌CAS-MEI-2-33是從雪茄外包皮煙葉中分離得到的，該菌株已經于2017年10月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101)，分類命名為特基拉芽孢桿菌(Bacillus tequilensis)，保藏編號為CGMCC NO.14826。

本發明特基拉芽孢桿菌(Bacillus tequilensis)CAS-MEI-2-33的篩選方法為：①菌懸液制備方法：將雪茄外包皮煙葉在無菌條件下粉碎后置于無菌0.85％生理鹽水中，35℃-37℃恒溫振蕩30-60min，轉速為150-180rpm/min，獲得菌懸液原液，然后利用梯度稀釋法獲得稀釋菌懸液。②利用以果膠為唯一碳源的篩選培養基進行篩選：將梯度稀釋的菌懸液涂布于篩選培養基上，37℃培養箱中倒置培養48h。

將篩選獲得的高產果膠酶細菌進行分子鑒定：利用引物27F和1492R對篩選到的高產果膠酶菌株進行分子鑒定，獲得菌株的屬水平上的分類信息。

本發明還提供了特基拉芽孢桿菌(Bacillus tequilensis)CAS-MEI-2-33在發酵生產果膠酶中的應用。

優選地，所述應用是利用所述特基拉芽孢桿菌(Bacillus tequilensis)CAS-MEI-2-33發酵煙草廢棄物生產果膠酶。

優選地，所述煙草廢棄物為煙梗。