[發明專利]一種檢測尿酸的熒光傳感器及其制備方法

有效

• 申請號: 201711409787.7
• 申請日: 2017-12-23
• 公開（公告）號: CN108152260B
• 公開（公告）日: 2019-06-07
• 發明（設計）人: 邱彬;胡水生;郭隆華;林振宇;陳國南
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;B82Y30/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊;李翠娥

1.一種檢測尿酸的熒光傳感器的制備方法，其特征在于：包括下列步驟：

1）配制不同濃度單位的尿酸溶液；

2）將具有熒光特性的二維金屬有機骨架材料NH₂-BDC-MOF納米片分散于超純水中超聲30 min，離心取上清液備用，上清液中NH₂-BDC-MOF納米片的濃度為200μg/mL；

3）取尿酸酶溶解在三（羥甲基）氨基甲烷-鹽酸鹽緩沖液中制得尿酸酶溶液，避光貯存在4℃備用；

4）取鄰苯二胺溶解在三（羥甲基）氨基甲烷-鹽酸鹽緩沖液中制得鄰苯二胺溶液，避光貯存在4℃備用；

5）分別取步驟2）配制的200μg /mL的NH₂-BDC-MOF 納米片溶液 50 μL、步驟3）配制0.1U/mL的尿酸酶溶液10 μL與步驟4）配制2 mM的鄰苯二胺溶液50 μL，將三者震蕩混合后，加入90 μL、50 mM、pH 7.4的Tris-HCl緩沖液補充體積到200 μL，于37℃下放置30分鐘，檢測熒光信號；

6）取步驟2）配制的200 μg/mL的NH₂-BDC-MOF 納米片溶液 50 μL、步驟3）配制0.1 U/mL的尿酸酶溶液10μL與50 μL不同濃度相同體積的尿酸溶液，再加入步驟4）配制2 mM的鄰苯二胺溶液50 μL，將四者震蕩混合后，加入40 μL 、50 mM pH 7.4的Tris-HCl緩沖液補充體積到200 μL，于37℃下孵育30分鐘，檢測不同濃度尿酸存在下的熒光信號；

7）根據不同濃度尿酸的熒光信號，構建熒光信號—濃度工作曲線。

2.根據權利要求1所述的檢測尿酸的熒光傳感器的制備方法，其特征在于：步驟2）所述的二維金屬有機骨架材料NH₂-BDC-MOF納米片的制備方法，包括以下步驟：

（1）將1.0-3.0 mg鄰氨基對苯二甲酸溶解在2.0-5.0 mL 體積比為2:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶劑中；

（2）將2.0-4.0 mg三水合硝酸銅溶解在2.0-5.0 mL體積比為1:2的 N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶劑中；

（3）配制1.0-3.0 mL 體積比為1:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶劑作為連接液；

（4）將鄰氨基對苯二甲酸溶液先加入到直徑為1.0-2.0 cm、容量為10-30 mL的試管底部，再加入1.0-3.0 mL的連接液，最后加入步驟2）制得的硝酸銅溶液；

（5）在試管在30-50℃水浴，對鄰氨基對苯二甲酸層進行加熱，反應24-48小時；

（6）得到灰色產物，利用離心洗去N，N-二甲基甲酰胺與乙腈，于真空烘箱中60-100℃干燥，制得二維金屬有機骨架材料NH₂-BDC-MOF納米片。

3.根據權利要求2所述的檢測尿酸的熒光傳感器的制備方法，其特征在于：步驟2）所述的二維金屬有機骨架材料NH₂-BDC-MOF納米片的制備方法，包括以下步驟：

（1）將1.5 mg鄰氨基對苯二甲酸溶解在3.0 mL 體積比為2:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶劑中；

（2）將3.0 mg三水合硝酸銅溶解在3.0 mL體積比為1:2的 N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶劑中；

（3）配制2.0 mL 體積比為1:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙腈的混合溶劑作為連接液；

（4）將鄰氨基對苯二甲酸溶液先加入到直徑為1.5 cm、容量為25 mL的試管底部，再加入2.0 mL的連接液，最后加入步驟2）制得的硝酸銅溶液；

（5）在試管在40℃水浴，對鄰氨基對苯二甲酸層進行加熱，反應24小時；

（6）得到灰色產物，利用離心洗去N，N-二甲基甲酰胺與乙腈，于真空烘箱中80℃干燥，制得二維金屬有機骨架材料NH₂-BDC-MOF納米片。

4.一種如權利要求1-3任一項所述的制備方法制得的檢測尿酸的熒光傳感器。

5.一種如權利要求4所述的熒光傳感器的使用方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）取NH₂-BDC-MOF 納米片溶液、尿酸酶溶液與鄰苯二胺溶液，將三者震蕩混合后，于37℃下放置30分鐘，檢測熒光信號；

2）往步驟1）中加入樣品溶液，于37℃下孵育30分鐘，檢測熒光信號；

3）將熒光信號代入熒光信號—濃度工作曲線，得出樣品中尿酸含量。