[發明專利]發紅色熒光的金納米團簇的制備方法及用于青霉胺的檢測方法

在審

• 申請號: 201711405089.X
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN108152259A
• 公開（公告）日: 2018-06-12
• 發明（設計）人: 張奎;何利芳
• 申請（專利權）人: 安徽工業大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;B22F9/24;B82Y40/00
• 代理公司: 安徽知問律師事務所 34134
• 代理人: 杜袁成

本發明公開一種發紅色熒光的金納米團簇的制備方法及用于青霉胺的檢測方法，還公開了一種針對實際水樣和尿液中青霉胺的靈敏檢測方法。本發明制備金團簇的方法簡單，反應條件溫和，得到的金團簇有良好的光穩定性和水溶性，高的量子產率。該金團簇結合銅離子構建熒光猝滅的傳感體系可以用于熒光增強型檢測青霉胺；這種針對青霉胺的檢測方法，檢測限低，選擇性好，抗干擾能力強，可以用于復雜實際樣品中青霉胺的檢測。當樣品中有青霉胺時，僅用簡易的手持紫外燈通過肉眼觀測樣品溶液顏色的變化就可以判斷實際樣品中青霉胺的存在。

技術領域：

本發明屬于金納米團簇制備及應用技術領域，具體涉及發紅色熒光的金納米團簇的制備方法及用于青霉胺的檢測方法，特別涉及該材料用于實際水樣和尿液中青霉胺濃度的定量分析。

背景技術：

青霉胺是青霉素的水解代謝產物，在藥學中有重要的應用價值。青霉胺可以用于治療纖維性肺病，重金屬中毒，進行性系統性硬化病。作為一種免疫抑制劑,通過減少T-淋巴細胞的個數，常用來治療類風濕關節炎。它還可以用于治療威爾遜癥，通過與體內積累的銅發生配位作用來調節體內紊亂的銅代謝。青霉胺雖然可以治療多種疾病，但是他還會引起一些副作用。20-30％服用青霉胺的患者會產生副作用，例如骨髓抑制，味覺障礙，厭食癥，嘔吐與腹瀉等。發展快速，靈敏的青霉胺的檢測方法對于臨床指導用藥具有重要的應用價值。現有研究證實每日服用劑量的20-50％在24小時后可以通過尿液排出體外，因此檢測尿液中青霉胺的含量可以對青霉胺的治療過程進行監測與評價。現在有多種方法可以用于青霉胺的檢測，包括化學發光，電化學，液相色譜等。這些傳統檢測方法雖然能夠滿足分析中的基本要求，但是總是存在儀器體積巨大笨重、操作繁瑣耗時、價格昂貴、樣品前處理過程復雜等問題。熒光傳感方法的應用可以克服上述問題，但是仍需通過構建新的識別原理和信號輸出模式提高檢測的靈敏度。

近年來，以金屬納米發光材料作為光學單元的熒光化學傳感器顯示了巨大的應用潛力。他們具有小的尺寸，良好的光穩定性，可調的表面特性以及基于尺寸的高發光效率，具有廣泛的應用前景。通過在金屬納米材料的表面進行功能調節，獲得發穩定紅色熒光的納米材料，利用新型的熒光化學傳感原理與方法，建立快速靈敏檢測青霉胺的技術，目前還未見報道。

發明內容：

本發明的目的是提供發紅色熒光的金納米團簇的制備方法及用于青霉胺的檢測方法，在不引入強還原劑的條件下，利用11-巰基十一烷酸，同時做為還原劑和穩定劑，簡化材料制備過程，溫和反應條件下合成發紅色熒光的金團簇，通過銅離子調控其熒光，利用競爭配位作用，實現熒光由打開-關閉-打開的對青霉胺的快速靈敏識別過程。銅離子猝滅的金團簇體系可用于熒光增強型檢測實際水樣和尿液中的青霉胺。

本發明所提供的發紅色熒光的金納米團簇的制備方法包括以下步驟：

在制備之前將所有玻璃器皿與磁力攪拌子在王水中浸泡10-120分鐘，并用超純水多次沖洗備用；將11-巰基十一烷酸(MUA)加入裝有超純水的圓底燒瓶中，隨后加入堿液控制氫氧根離子濃度為0.02-0.1mol/L，攪拌5-30分鐘以后加入的氯金酸反應并持續攪拌3-24小時后停止反應，將反應溶液加入透析袋中透析3-48小時，然后離心，取出上層清液，得到所述的金納米團簇；本發明中11-巰基十一烷酸與金的摩爾比為(2-8):1；所述的堿液為氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液。本發明在制備過程中沒有額外加入還原劑，其中11-巰基十一烷酸既做為還原劑，也是穩定劑，反應條件更溫和。

本發明提供一種發紅色熒光的金納米團簇用于青霉胺的檢測方法的具體步驟如下：

(1)銅離子猝滅金納米團簇的混合體系的制備：

將金納米團簇(MUA-AuNCs)加入pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液中，記錄其熒光強度值，隨后不斷向體系中加入銅離子，隨著銅離子濃度增加，熒光強度逐漸降低，當熒光強度猝滅至百分之八十時的銅離子濃度做為最優的銅離子濃度，混合銅離子與金納米團簇形成熒光猝滅的混合體系(MUA-AuNCs-Copper ensemble)，用于下一步檢測青霉胺。